[发明专利]一种烟草中新植二烯的提取纯化和检测方法及其应用

摘要

本发明公开了一种烟草中新植二烯的提取纯化和检测方法及其应用。所述提取纯化方法：向烟草样品中加入分析纯二氯甲烷，超声提取，滤纸过滤，取一定量粗提液过硅胶柱进行初步的分离纯化，用石油醚洗脱，将洗脱液浓缩，用制备色谱进一步纯化、浓缩，并用色谱纯二氯甲烷反提得到新植二烯样品。本方法以初烤烟叶为原料直接进行提取，取材方便、廉价易得。与化学合成相比，本方法步骤少、操作简单，经分析检测，本发明制备得到的新植二烯纯度高达99.42％，远高于市面所售新植二烯纯度，且不含新植二烯二聚体，因此作为标准物质进行烟草香气物质及其前体物的定量分析时更为准确。

主权项

1.一种烟草中新植二烯的提取纯化方法，所述提取纯化方法包括如下步骤：（1）向烟草样品中加入卤化烃类有机溶剂进行超声处理，超声处理期间间隔震荡若干次，过滤得粗提液 ；（2）将步骤（1）得到的粗提液进行旋蒸浓缩处理，加入卤化烃类有机溶剂溶后将样品转移至硅胶上进行拌样处理，然后转移至硅胶柱中进行上样处理；（3）使用洗脱剂进行洗脱处理，收集洗脱液；（4）将步骤（3）得到的洗脱液旋蒸浓缩近干，使用醇类有机溶剂溶解后过有机相滤膜并用制备色谱进一步纯化；（5）将步骤（4）制备色谱分离纯化后的溶液旋蒸浓缩并用卤化烃类有机溶剂反提除水得新植二烯样品；其中，所述步骤（1）、（2）和（5）中的卤化烃类有机溶剂为分析纯二氯甲烷；所述步骤（3）中，洗脱剂为石油醚；洗脱处理具体为：第一个柱体积洗脱液舍弃，收集后两个柱体积洗脱液；所述步骤（4）中，水浴处理温度为30‑35℃；醇类有机溶剂为色谱纯甲醇；有机相滤膜规格为0.45μm有机相滤膜；制备色谱进一步纯化所采用的条件为：流动相A为甲醇，流动相B为0.1%甲酸；0min，A:B=90：10；6min，A:B=98：2；9min，A:B=90：10；12min，A:B=90：10；进样量为2mL，扫描波长220‑260nm，收集4.2min‑5.4min之间的组分。