[发明专利]一种谷物中伏马毒素的液相色谱串联质谱检测方法

摘要

本发明公开一种谷物中伏马毒素的液相色谱串联质谱检测方法，即将谷物样品溶解于甲醇溶液中，离心收集上清液，再注入含有季胺基的固相萃取柱洗脱，收集洗脱液吹干获得残渣，将残渣再次溶解于甲醇溶液中，过滤，滤液为样品提纯液体，对样品提纯液体进行高效液相色谱串联质谱检测，检测结果带入公式1曲线进行比对，即获得样品中伏马毒素的含量；本发明耗时短，灵敏准确的特点，可适用于大批量样品的检测，解决了传统的伏马毒素采用免疫亲和柱检测成本高或需要衍生化过程复杂的问题，本方法的建立使小麦和玉米等植物中伏马毒素的含量得以准确测定，能为农产品质量安全风险评估提供准确的分析方法。

主权项

1.一种谷物中伏马毒素的液相色谱串联质谱检测方法，其特征在于，具体步骤如下：(1)样品提纯将等体积的甲醇与水混合后，按照体积质量比5:1加入谷物样品粉末中，以180rpm振荡30min后，2500rpm离心5min，收集上清液；取3mL上清液注入含有季胺基的固相萃取柱，流速1d/s，然后分别取甲醇和水各5mL淋洗固相萃取柱,流速2d/s；再将甲醇与甲酸按体积比99:1混合后，取10mL加入固相萃取柱，流速2d/s，收集洗脱液以氮气吹干，吹干后的残渣溶解于体积比为50％的甲醇水溶液中，过0.22μm的滤膜，收集滤液，即为样品提纯液体；所述质量比单位为mL/g；所述谷物样品粉末是指过2.00mm孔筛后的谷物样品粉末；(2)取浓度依次为20，100，500，1000，2000ng/mL的伏马毒素标准溶液，分别进行高效液相色谱串联质谱检测，获得伏马毒素标准曲线；(3)对步骤(1)获得的样品提纯液体进行高效液相色谱串联质谱检测，检测结果带入步骤(2)获得的标准曲线，以外标法测得样品中各伏马毒素的浓度，再通过公式(1)计算获得样品中伏马毒素的含量；                            （1）式(1)中：Xi——样品中各伏马毒素残留含量，单位为mg/kg；Ai——样品中各伏马毒素的峰面积；Asi——伏马毒素标准溶液中各伏马毒素的峰面积；ci——伏马毒素标准溶液中各伏马毒素的浓度，单位为μg/mL；V——样品最终定容体积，单位为mL；m——最终样品代表的试样量，单位为g；所述高效液相色谱串联质谱检测具体是指：(1)色谱条件：a)色谱柱：菲罗门Kinetex100A色谱柱；b)进样量：2μL；c)柱温：40℃；d)流速：0.5mL/min；e)流动相和洗脱时间：流动相A：0.385g/L的醋酸铵溶液；流动相B：甲醇；洗脱时间0‑1.6min，初始流动相A从90％到60％，流动相B从10％到40％；洗脱时间1.6‑10min，流动相A从60％到40％，流动相B从40％到60％；洗脱时间10‑11min，流动相A从40％到90％，流动相B从60％到10％；洗脱时间11‑12min，流动相A从90％到40％，流动相B从10％到60％；洗脱时间12‑15min，流动相A维持90％，流动相B维持10％;共运行15min；(2)质谱条件：电喷雾电离正离子模式，离子源温度500℃，驻留时间100ms，雾化气压50psi，辅助气压50psi，喷雾电压5500V，碰撞室射出电压6V，通过MRM方式进行定量；所述伏马毒素为FB₃。