[发明专利]同时检测金黄色葡萄球菌及其5种肠毒素的试剂盒及方法有效
| 申请号： | 201610889975.3 | 申请日： | 2016-10-11 |
| 公开（公告）号： | CN106520923B | 公开（公告）日： | 2020-01-17 |
| 发明（设计）人： | 扈庆华;陈清凉;姜伊祥;石晓路;林一曼;邱亚群;李迎慧;江敏;陈琼城 | 申请（专利权）人： | 深圳市疾病预防控制中心 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/686;C12Q1/14;C12N15/11;C12R1/445 |
| 代理公司： | 44237 深圳中一专利商标事务所 | 代理人： | 黄志云 |
| 地址： | 518000 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种同时检测金黄色葡萄球菌及其5种肠毒素的试剂盒及方法。所述同时检测金黄色葡萄球菌及其5种肠毒素的试剂盒，包括一对通用引物、一条荧光探针和根据金黄色葡萄球菌及其5种肠毒素特异性基因设计的杂交连接探针。所述同时检测金黄色葡萄球菌及其5种肠毒素的检测方法，以待测样本提取的可疑菌的DNA为模板，采用多重连接探针扩增技术和荧光探针熔解曲线技术相结合进行检测，通过溶解曲线分析处理待测样品中金黄色葡萄球菌及其5种肠毒素的情况。 | ||
| 搜索关键词： | 同时 检测 金黄色 葡萄球菌 及其 毒素 试剂盒 方法 | ||
【主权项】：
1.一种同时检测金黄色葡萄球菌及其5种肠毒素的试剂盒，其特征在于，包括一对通用引物、一条荧光探针和根据金黄色葡萄球菌及其5种肠毒素特异性基因设计的杂交连接探针；其中，/n所述通用引物的序列为SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示；/n所述荧光探针为ROX荧光探针，序列为SEQ ID NO：3所示；所述荧光探针ROX的3’端连接有BHQ淬灭基团；/n所述根据金黄色葡萄球菌及其5种肠毒素特异性基因设计的杂交连接探针如下：/n金黄色葡萄球菌的杂交连接探针序列为SEQ ID NO：16和SEQ ID NO：17所示；/nA型肠毒素的杂交连接探针序列为SEQ ID NO：18和SEQ ID NO：19所示；/nB型肠毒素的杂交连接探针序列为SEQ ID NO：20和SEQ ID NO：21所示；/nC型肠毒素的杂交连接探针序列为SEQ ID NO：22和SEQ ID NO：23所示；/nD型肠毒素的杂交连接探针序列为SEQ ID NO：24、SEQ ID NO：25所示；/nE型肠毒素的杂交连接探针序列为SEQ ID NO：26和SEQ ID NO：27所示；/n所述荧光探针ROX同时检测金黄色葡萄球菌及其5种肠毒素基因，其Tm值分别为，E型肠毒素：Tm值54.0±1℃，D型肠毒素：Tm值57.5±1℃，金黄色葡萄球菌耐热核酸酶编码基因：Tm值62.5±1℃，C型肠毒素：Tm值66.0±1℃，B型肠毒素：Tm值70.0±1℃，A型肠毒素：Tm值74.5±1℃。/n
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