[发明专利]神经干细胞培养液及培养方法有效
| 申请号： | 201610890386.7 | 申请日： | 2016-10-12 |
| 公开（公告）号： | CN106479980B | 公开（公告）日： | 2019-12-31 |
| 发明（设计）人： | 高歌;陈瑛 | 申请（专利权）人： | 上海爱萨尔生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0797 | 分类号： | C12N5/0797 |
| 代理公司： | 31292 上海领洋专利代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 刘秋兰 |
| 地址： | 201203 上海*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基于外周血单核细胞培养神经干细胞的培养液，所述培养液包括：体积比为1:0.8～1.2的DMEM/F12培养基和神经细胞基础培养基，以及腺苷酸环化酶激活剂、血清替代物、L‑抗坏血酸、L‑谷氨酰胺衍生物、ALK抑制剂、GSK‑3抑制剂、ALK‑2,3,6,AMPK抑制剂和ALK‑4,5,7抑制剂。本发明还公开了一种基于外周血单核细胞培养神经干细胞的培养方法，使用所述培养液，可以外周血单核细胞为原料定向分化培养得到神经干细胞，取材方便，且无数量限制，可避免道德争议。 | ||
| 搜索关键词： | 神经 干细胞 培养液 培养 方法 | ||
【主权项】：
1.一种基于外周血单核细胞的神经干细胞培养液，其特征在于，所述培养液由：体积比为1:0.8～1.2的DMEM/F12培养基和神经细胞基础培养基Neurobasal medium，以及腺苷酸环化酶激活剂、血清替代物、L-抗坏血酸、L-谷氨酰胺衍生物、ALK抑制剂、GSK-3抑制剂、ALK-2,3,6,AMPK抑制剂、ALK-4,5,7抑制剂和视黄酸组成；所述腺苷酸环化酶激活剂为毛喉素；所述L-谷氨酰胺衍生物为GlutaMAX-I二肽；所述血清替代物为N2和/或B27；所述ALK抑制剂为LDK378和/或GSK1838705A；所述GSK-3抑制剂为CHIR-98014、CHIR-99021HCl和/或SB216763；所述ALK-2,3,6,AMPK抑制剂为Dorsomorphin、Dorsomorphin 2HCl和/或LDN-193189；所述ALK-4,5,7抑制剂为A83-01和/或SB431542；所述腺苷酸环化酶激活剂浓度为3～8μmol/L，所述血清替代物浓度为3～9mmol/L，L-抗坏血酸浓度为0.06～0.15mmol/L，所述L-谷氨酰胺衍生物浓度为5～15mmol/L，所述ALK抑制剂浓度为1～3mmol/L，所述GSK-3抑制剂浓度为0.55～0.65mmol/L，所述ALK-2,3,6,AMPK抑制剂浓度为1.5～2.5mmol/L，所述ALK-4,5,7抑制剂浓度为1.6～2.7mmol/L，视黄酸浓度范围为0.05～0.15mmol/L。/n
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