[发明专利]一种基于3D生物打印修复人关节软骨的方法

摘要

本发明涉及一种基于3D生物打印修复人关节软骨的方法，包括以下步骤：a）PEG与甲基丙烯酰氯制备PEGDMA并纯化；b）分离人间充质干细胞；c）将人间充质干细胞传代并调整密度，待细胞贴壁后更换诱导培养基培养；d）清洗牛股骨，在骨软骨栓塞的中心位置用无菌活体穿孔器做出全层软骨缺损，将骨软骨栓塞置于DMEM中培养成3D生物纸；e）将纯化的PEGDMA溶解，加入光引发剂2959，将步骤ｃ）诱导所得软骨细胞重悬在过滤除菌的PEGDMA溶液中制成生物墨水；f）将生物打印机消毒灭菌后加入生物墨水，按照设计的形状和大小在3D生物纸上打印出3D软骨，将3D软骨置于诱导培养基中培养。本发明的优点在于：操作简单快速且准确，细胞毒性小，非常有希望成为临床软骨修复的方法。

主权项

一种基于3D生物打印修复人关节软骨的方法，其特征在于：包括以下步骤：PEG与甲基丙烯酰氯过夜反应制备PEGDMA并纯化；采用全骨髓贴壁法分离人间充质干细胞；将生长状态良好的人间充质干细胞传代并调整密度，待细胞贴壁后更换诱导培养基培养；清洗新鲜牛股骨，在骨软骨栓塞的中心位置用无菌活体穿孔器做出全层软骨缺损，将骨软骨栓塞置于DMEM中培养成3D生物纸；将纯化的PEGDMA溶解，加入光引发剂2959，将步骤ｃ）诱导所得软骨细胞重悬在过滤除菌的PEGDMA溶液中制成生物墨水；将生物打印机消毒灭菌后加入生物墨水，按照设计的形状和大小在3D生物纸上层层打印出3D软骨，将3D软骨置于诱导培养基中培养。