[发明专利]肝细胞培养液及培养方法有效
| 申请号： | 201610890462.4 | 申请日： | 2016-10-12 |
| 公开（公告）号： | CN106479957B | 公开（公告）日： | 2019-11-19 |
| 发明（设计）人： | 高歌;陈瑛 | 申请（专利权）人： | 上海爱萨尔生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 31292 上海领洋专利代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 刘秋兰<国际申请>=<国际公布>=<进入 |
| 地址： | 201203 上海*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基于外周血单核细胞的肝细胞培养液，所述培养液包括：体积比为1:0.9～1.3的DMEM/F12培养基和肝细胞培养基Hepato ZYME‑SFM，以及肝细胞生长因子、L‑抗坏血酸、L‑谷氨酰胺、Wnt激活剂、GSK‑3β抑制剂和TGF‑β抑制剂。本发明还公开了一种由外周血单核细胞培养肝细胞的培养方法，使用所述培养液，可由外周血单核细胞为原料定向培养得到肝细胞，取材方便，培养时间短，可避免伦理道德争议。 | ||
| 搜索关键词： | 肝细胞 培养液 培养 方法 | ||
【主权项】：
1.一种诱导外周血单核细胞定向分化为肝细胞的肝细胞培养液，其特征在于，所述培养液由：体积比为1:(0.9～1.3)的DMEM/F12培养基和肝细胞培养基Hepato ZYME-SFM，以及肝细胞生长因子、L-抗坏血酸、L-谷氨酰胺、Wnt激活剂、GSK-3β抑制剂和TGF-β抑制剂组成，或者由：体积比为1:(0.9～1.3)的DMEM/F12培养基和肝细胞培养基Hepato ZYME-SFM，以及肝细胞生长因子、L-抗坏血酸、L-谷氨酰胺、Wnt激活剂、GSK-3β抑制剂、TGF-β抑制剂和地塞米松组成；所述Wnt激活剂为SB216763；所述GSK-3β抑制剂为Kenpaullone和/或Indirubin-3’-monoxime；所述TGF-β抑制剂为LY364947和/或SB431542；肝细胞生长因子物浓度为2～10mmol/L，L-抗坏血酸浓度为0.10～0.16mmol/L，L-谷氨酰胺浓度为4～16mmol/L，所述Wnt激活剂浓度为15～40μmol/L，所述GSK-3β抑制剂浓度为0.02～0.10μmol/L，所述TGF-β抑制剂浓度为3～15μmol/L，地塞米松的浓度为0.02～0.16μmol/L。/n
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