[发明专利]一种固相萃取-比色法测定西洋参中总皂甙的方法

摘要

本发明公开了一种固相萃取‑比色法测定西洋参中总皂甙的方法，步骤包括(1)样品前处理，(2)固相萃取，(3)比色法测定，(4)绘制标准曲线并计算结果。本发明采用超声提取法对西洋参胶囊中总皂苷进行提取，运用固相萃取法萃取净化样品中总皂甙，既能使其中油脂、杂质糖等与总皂甙得到较好的分离，使目的产物萃取下来，又具有较高的稳定性。香草醛‑高氯酸‑冰乙酸比色法在40min内对总皂甙含量进行分析测定，结果稳定性好且精密度高。本发明的方法，较之传统方法简便易行，重现性、回收率高，适用于以西洋参为代表的保健食品中总皂苷含量及品质的分析，对保健食品的质量控制具有重要参考意义。

主权项

1.一种固相萃取‑比色法测定西洋参中总皂甙的方法，其特征在于，步骤如下：(1)样品前处理：精密称取0.5g样品，置于50mL容量瓶中，按料液比1g:30mL加水溶解，60℃超声30min，放至室温，纯水定容至50mL，摇匀，放置，作为样品溶液；(2)固相萃取：对固相萃取柱进行活化处理，样品溶液上活化处理后的固相萃取柱，依次用25mL水、25mL质量浓度70％乙醇进行洗脱，收集质量浓度70％乙醇洗脱液于50mL离心管中，将收集的洗脱液置于蒸发皿中，60℃下水浴挥干；(3)比色法测定：在步骤(2)所得已挥干的洗脱液中准确加入0.2mL 5％香草醛冰乙酸溶液，使残渣全部溶解，再加0.8m L高氯酸，充分混匀后精密吸取0.5mL于10mL具塞离心管中，60℃水浴上加热15min，冰浴冷却后，准确加入冰乙酸5.0mL，摇匀后，以1cm比色皿于560nm波长处测定吸光度；(4)绘制标准曲线并计算结果：以人参皂苷Re配置标准溶液，精密吸取标准溶液20μL、40μL、60μL、80μL、100μL、200μL，于10mL具塞离心管中，40‑50℃热风挥干后，按照步骤(3)的方法在560nm处分别测定吸光度，以吸光度为纵坐标，人参皂苷Re质量为横坐标，绘制标准曲线，将步骤(3)测得的样品吸光度代入标准曲线方程，计算获得样品中总皂甙的含量；步骤(2)中所述活化处理为：控制流速在2.5mL/min，用25mL质量浓度70％乙醇冲洗后用25mL纯水淋洗；步骤(2)中所述洗脱速度控制在0.8mL/min；步骤(2)中所述固相萃取型号为：Agela Technologies，CleanertPS/AL，规格：填料1g，柱体积6mL；步骤(2)样品溶液上活化处理后的固相萃取柱的上样速度控制在1mL/min；步骤(3)中标准溶液的配制方法为：精密称取干燥至恒重的人参皂苷Re 20mg置于10mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为标准溶液。