[发明专利]一种甘蔗叶片中苹果酸含量的HPLC检测方法有效
| 申请号： | 201610897040.X | 申请日： | 2016-10-14 |
| 公开（公告）号： | CN106546685B | 公开（公告）日： | 2019-06-07 |
| 发明（设计）人： | 王泽平;梁强;林善海;周珊;罗霆;韦金菊;刘璐;张革民;高轶静;杨翠芳;张保青;林波;蒋洪涛;段维兴 | 申请（专利权）人： | 广西壮族自治区农业科学院甘蔗研究所（中国农业科学院甘蔗研究中心） |
| 主分类号： | G01N30/06 | 分类号： | G01N30/06;G01N30/89 |
| 代理公司： | 南宁东智知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 45117 | 代理人： | 戴燕桃;韩畅 |
| 地址： | 530007 广西壮族自治*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种甘蔗叶片中苹果酸含量的HPLC检测方法，包括以下步骤：S1.将待测的甘蔗叶片加入液氮磨碎，再加入70~90%甲醇水溶液研磨成浆，2~5℃浸提，超声提取，离心，取上清液，残渣再加入70~90%甲醇水溶液超声提取，离心后取出上清液，重复残渣浸提和离心操作1~3次，合并上清液，用70~90%甲醇定容，过滤；S2.采用HPLC检测样品溶液中苹果酸的含量。本方法能准确检测出甘蔗叶片中苹果酸含量，为判断甘蔗品种对梢腐病感抗差异研究和苹果酸介导甘蔗梢腐病病原菌胁迫应答生化机制提供科学有力的检测技术。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 甘蔗 叶片 苹果酸 含量 hplc 检测 方法 | ||
【主权项】：
1.一种甘蔗叶片中苹果酸含量的HPLC 检测方法的应用，其特征在于：一种甘蔗叶片中苹果酸含量的HPLC 检测方法在判断甘蔗品种对梢腐病感性和抗性差异方面的应用；所述甘蔗叶片中苹果酸含量的HPLC 检测方法包括以下步骤：S1.将待测的甘蔗叶片加入预冷至2~5℃的体积分数为70~90%甲醇水溶液，再加入液氮研磨成浆，定容，2~5℃浸提50~90min，超声提取1.5~3h，离心，取上清液，残渣再加入预冷至2~5℃的体积分数为70~90%甲醇水溶液超声提取20~40min，离心后取出上清液，重复残渣浸提和离心操作0~3次，合并上清液，用70~90%甲醇定容，过滤，作为样品溶液备用；S2.采用HPLC检测样品溶液中苹果酸的含量，色谱条件为：ARigol L3000高效液相色谱仪；色谱柱：CST C18反相色谱柱，250mm*4.6mm,5μm；流动相：12.5mmol/L的磷酸二氢钠水溶液800mL，加入16mL甲醇，用0.5mol/L的磷酸水溶液调节溶液pH至2.8，混匀；柱温：35℃；流速：0.8 mL/min；检测波长：214nm；进样体积：10μL。
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