[发明专利]一种甘蔗叶片中赤霉素含量的HPLC检测方法有效

专利信息
申请号: 201610897056.0 申请日: 2016-10-14
公开(公告)号: CN106442792B 公开(公告)日: 2019-04-26
发明(设计)人: 王泽平;刘璐;李毅杰;段维兴;梁强;张革民;罗霆;韦金菊;高轶静;林波;周珊;杨翠芳;林善海;张保青 申请(专利权)人: 广西壮族自治区农业科学院甘蔗研究所(中国农业科学院甘蔗研究中心)
主分类号: G01N30/02 分类号: G01N30/02;G01N30/06
代理公司: 南宁东智知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 45117 代理人: 戴燕桃;韩畅
地址: 530007 广西壮族自治*** 国省代码: 广西;45
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摘要: 发明公开了一种甘蔗叶片中赤霉素含量的HPLC检测方法,包括以下步骤:S1.将待测的甘蔗叶片加入液氮磨碎,甲醇浸提,离心,取上清液,残渣用甲醇浸提,离心后取出上清液,合并上清液,减压蒸发,石油醚萃取脱色,下层水相减压蒸干,加入流动相溶解,定容,过滤,作为样品溶液备用;S2.采用HPLC检测样品溶液中赤霉素的含量。本方法能准确检测出甘蔗叶片中赤霉素含量,为研究其介导甘蔗梢腐病病原菌胁迫应答的生化机制提供科学依据。
搜索关键词: 一种 甘蔗 叶片 赤霉素 含量 hplc 检测 方法
【主权项】:
1.一种甘蔗叶片中赤霉素含量HPLC 检测方法的应用,其特征在于:甘蔗叶片中赤霉素含量HPLC 检测方法在判断甘蔗品种对梢腐病感性和抗性差异方面的应用;所述HPLC 检测方法包括以下步骤:S1. 待测的甘蔗叶片在冰盒下剪下,加入液氮磨碎,加入预冷至4℃的体积分数为80%甲醇水溶液,液固比为0.2~0.5g/mL, 4℃浸提16h,离心,取上清液,残渣再加入预冷至4℃的体积分数为80%甲醇水溶液浸提2h,离心后取出上清液,合并上清液,40℃下减压蒸发至不含甲醇,加入石油醚萃取脱色3次,弃去上层有机相,下层水相在40℃下减压蒸干,加入HPLC检测所用流动相溶解,定容,采用0.45μm微孔滤膜过滤,作为样品溶液备用;S2.采用HPLC检测样品溶液中赤霉素的含量,HPLC色谱条件为:流动相由甲醇、超纯水和乙酸按体积比200:300:3混合制成,柱温为35℃,流速1ml/min,进样量 10μL,紫外检测波长 306nm。
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