[发明专利]一种氧化细菌纤维素/海螵蛸骨修复材料的制备方法

摘要

本发明公开了一种氧化细菌纤维素/海螵蛸骨修复材料的制备方法，属于骨修复材料制备技术领域。本发明将大叶种晒青毛茶与去离子水加热保温，过滤得滤液，加入蔗糖等混合制得培养基，接种木醋杆菌摇床培养，培养物经离心得下层菌种，与葡萄糖等混合厌氧发酵，得细菌纤维素膜，经洗涤后与双氧水混合氧化后，加入羟基磷灰石、海螵蛸制得的混合粉末，再用胎牛血清浸泡，再经真空冷冻干燥、粉碎过筛制得骨修复材料。本发明的有益效果是：本发明制备步骤简单，所得骨修复材料生物相容性好，可有效诱导骨细胞生长；本发明骨修复材料力学性能好，与其它材料相比提高了25～30%，有效增强材料骨修复能力和效果。

主权项

一种氧化细菌纤维素/海螵蛸骨修复材料的制备方法，其特征在于具体制备步骤为：（1）称取20～30g大叶种晒青毛茶，加入到装有300～400mL去离子水的烧杯中，对其加热至沸腾，保温20～30min，随后停止加热，过滤，收集滤液并置于培养皿中，再分别加入10～20g蔗糖、6～8g蛋白胨、8～12g酵母粉和600～700mL去离子水，搅拌均匀后，将培养皿移入灭菌罐中，在100～110℃下高温灭菌5～10min，制得培养基，再按接种量8～12%，将木醋杆菌接种至培养基中，并将培养基置于摇床中，在35～45℃、120～150r/min下培养12～24h；（2）培养结束，将培养物置于离心机中，在1000～1200r/min下离心30～40min，收集下层菌种，随后依次称取10～20g葡萄糖、20～30g甘露醇、3～5g蛋白胨和800～1000mL去离子水，搅拌混合后置于发酵罐中，同时向发酵罐中加入6～8g下层菌种，在25～35℃下厌氧发酵3～4天；（3）发酵结束后，将细菌纤维素膜取出，用去离子水洗涤3～5次，并置于烧杯中，加入去离子水将其浸没，随后对其进行加热至沸腾，保温1～2h，再用去离子水洗涤3～5次，得到细菌纤维素，将其置于烧杯中，再加入300～400mL质量分数为30%双氧水，氧化6～7h，得到氧化细菌纤维素；（4）称取10～20g羟基磷灰石和6～8g海螵蛸，依次加入到粉碎机中进行粉碎，过80～120目筛，得到混合粉末，将混合粉末加入到烧杯中，再加入上述氧化细菌纤维素，并加入胎牛血清将其浸没，在37℃下浸泡6～7天，每隔24～26h更换一次胎牛血清，浸泡结束后，将沉积羟基磷灰石与海螵蛸的氧化细菌纤维素取出，并置于真空冷冻箱中，在‑35～‑25℃下干燥10～12h，随后将其置于粉碎机中进行粉碎，过100～200目筛，即得氧化细菌纤维素/海螵蛸骨修复材料。