[发明专利]一种精准Fc位点共价偶联标记的生物素化抗体

摘要

本发明公开了一种精准Fc位点共价偶联标记的生物素化抗体，本发明以基因工程技术表达带有光敏基团(Bpa)的Z亲和肽‑Avitag融合蛋白并BirA酶催化完成其生物素共价定点偶联，获得一种精准Fc位点偶联的生物试剂ZBpa‑Biotin，由亲和肽导向Fc位点亲和偶联后，继而在365nm紫外光激发光敏基团与抗体生产共价键，实现Fc位点的生物素共价偶联标记的生物素化抗体。本发明所提供的精准Fc位点的生物素化抗体，是一种Fc位点不可逆的共价偶联，不受pH、温度、有机溶剂及变性剂的影响，可在包被了亲和素的载体表面所固定的IgG抗体是均一、Fab段充分暴露及保持高抗原结合活性的三维定向IgG抗体，且在实际应用中突破了被分析物中不能有结合Z亲和肽物质的限制。

主权项

一种精准导向Fc位点偶联的生物试剂，该生物试剂包括Z亲和肽，其特征是：所述Z亲和肽的α1结构域处连接有4‑苯甲酰基‑L‑苯丙氨酸，所述Z亲和肽的羧基末端残基处依次连接Avi‑tag标签蛋白和多聚组氨酸纯化标签蛋白，其中所述Avi‑tag标签蛋白上的赖氨酸残基上连接生物素或其衍生物。