[发明专利]一种苔藓与荒漠藻复合结皮的培育方法

摘要

本发明公开了一种苔藓与荒漠藻复合结皮的培育方法，步骤是：A、在夏季采集待修复地区自然生境中的优势苔藓种类；B、苔藓的活性恢复；C、用蒸馏水冲洗活性恢复后的苔藓结皮，获得苔藓配子体；D、消毒后的苔藓配子体放入固体培养基中进行培养获得苔藓原丝体；E、挑取苔藓原丝体进行液体静置培养获得分化的配子体，将配子体放入液体培养基中通气培养；F、将荒漠藻用液体培养基通气培养至对数生长期，去除上清后获得藻浆；G、将苔藓配子体与荒漠藻藻浆混合后接种至沙化土壤表面，培育获得苔藓和荒漠藻的复合结皮。方法易行，操作方便，加速了荒漠地区生物土壤结皮的演替过程，实现了干旱和半干旱地区荒漠化土壤快速的治理。

主权项

1.一种苔藓与荒漠藻复合结皮的培育方法，其步骤是：A、荒漠化待治理地区苔藓优势种确认和苔藓结皮的采集与保存：根据广泛的调查，在夏季识别待修复地区自然生境中生物土壤结皮的优势苔藓种类，选择该种类发育的苔藓结皮，用环刀采集表层结皮，室温下风干10‑15天备用；B、苔藓结皮的活性恢复：风干的苔藓样品喷水至完全湿润后培养至少48小时使其活性恢复；苔藓样品活性恢复过程中温度设置为10‑15 °C，光照强度为5‑20 μmol m^‑2s^‑1，光暗周期为12/12，湿度为60%‑80%；C、用蒸馏水冲掉活性恢复的苔藓结皮包含的沙土，获得苔藓配子体，将获得的苔藓配子体在无菌蒸馏水中清洗后进行消毒处理，消毒处理用质量分数5%的次氯酸钠消毒10秒，再用无菌的蒸馏水清洗三次；D、固体培养获得原丝体：消毒后的苔藓配子体放入固体培养基中进行培养以获得原丝体，所述的固体培养基为含有质量分数1%‑1.5%琼脂的BG11固体培养基，培养条件为：温度分别为白天25‑30°C、黑夜10‑15 °C，光暗周期为12/12小时，环境湿度60%‑80%，光照强度为培养初期15 μmol m^‑2s^‑1，待原丝体适应环境后开始大量繁殖时，光照强度增加为70‑100 μmol m^‑2s^‑1，培养周期为15‑20天；E、液体培养获得配子体：在显微镜下挑取固体培养得到的苔藓原丝体，将苔藓原丝体放入CT液体培养基中静置培养，培养周期为20‑30天，苔藓原丝体分化为苔藓配子体，将苔藓配子体放入液体CT培养基中进行通气扩大培养，获得用于接种的苔藓配子体，培养周期为30‑40天，所述的CT液体培养基，其配方为：150 mg L^‑1 四水硝酸钙、100 mg L^‑1 硝酸钾、40 mg L^‑1 七水硫酸镁、25 mg L^‑1 五水β甘油磷酸钠、400 mg L^‑1 三羟甲基甲胺基丙磺酸、2.25 mg L^‑1 乙二胺四乙酸二钠、0.123 mg L^‑1 四水氯化锰、0.015 mg L^‑1 七水氯化锌、0.012 mg L^‑1 二水钼酸钠、0.291 mg L^‑1 六水氯化铁、0.006 mg L^‑1 六水氯化钴；F、荒漠藻藻种和液体培养获得大量生物质：将荒漠藻用液体培养基通气培养至对数生长期，去除上清后获得藻浆，所述的荒漠藻为微鞘藻属、伪枝藻属、念珠藻属、席藻属、鞘丝藻属其中的一种或二至五种的任意混合，荒漠藻培养所用培养基为液体BG11培养基；G、混合接种、结皮养护和形成苔藓与荒漠藻复合结皮：将苔藓配子体与荒漠藻藻浆混合后接种至沙化土壤表面，定期维护，培育获得苔藓和荒漠藻的复合结皮。