[发明专利]一种快速显示橡胶树树皮乳管的组织化学方法

摘要

本发明公开了一种快速显示橡胶树树皮乳管的组织方法，包括如下步骤：a)将橡胶树树皮修切成长0.5cm×宽0.5cm的切片组织块，置于盛有固定液的离心管中；b)打开离心管盖子，放入连接真空泵的玻璃干燥器中，抽气1‑2min；c)换新鲜的固定液，在室温条件下固定4‑6h后，用缓冲液浸洗3次，每次30min；d)将步骤c)中的材料从固定液过渡到不同浓度梯度的保护剂中；e)将步骤d)中最高浓度保护剂中的材料，用OCT包埋剂中包埋，置于‑20℃冷冻台，冷凝20分钟；f)取出步骤e)中的材料，按常规冰冻切片方法进行切片；g)用室温的普通载玻片粘取切片；h)用封片剂封片，荧光显微镜观察。本发明方法操作简单、省工省地、重复性和通用性好并可批量筛选。

主权项

1.一种快速显示橡胶树树皮乳管的组织方法，包括如下步骤：a)将橡胶树树皮修切成长0.5cm×宽0.5cm的切片组织块，置于盛有固定液的离心管中；b)打开离心管盖子，放入连接真空泵的玻璃干燥器中，抽气1‑2min；c)换新鲜的固定液，在室温条件下固定4‑6h后，用缓冲液浸洗3次，每次30min；d)将步骤c)中的材料从固定液依次过渡到不同浓度梯度的保护剂中；保护剂的浓度由低至高；e)将步骤d)中最高浓度保护剂中的材料，用OCT包埋剂包埋，置于‑20℃冷冻台，冷凝20分钟；f)取出步骤e)中的材料，按常规冰冻切片方法进行切片；g)用室温的普通载玻片粘取切片；h)用封片剂封片，荧光显微镜观察；其中，步骤a)中，所述固定液是4wt％多聚甲醛和2.5wt％戊二醛的0.01M的pH 7.2磷酸缓冲液；其中，在荧光显微镜的白光下观察，乳管中的物质呈棕褐色；在荧光显微镜的488nm蓝光激发下，乳管中的物质呈绿色。