[发明专利]一种脊尾白虾线粒体基因组拷贝数的定量检测方法在审
| 申请号： | 201610906439.X | 申请日： | 2016-10-18 |
| 公开（公告）号： | CN106498044A | 公开（公告）日： | 2017-03-15 |
| 发明（设计）人： | 高焕;张培;赖晓芳;李志辉;薛蓓;赵莲;阎斌伦 | 申请（专利权）人： | 淮海工学院 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 222005 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种脊尾白虾线粒体基因组拷贝数的定量检测方法，包括如下步骤分别选择腺苷酸转移酶基因(ANT)和ATP6基因作为脊尾白虾细胞核基因组和线粒体基因组的单拷贝基因，设计适于ANT和ATP6基因实时定量PCR反应的引物和Taqman荧光探针；制备ANT和ATP6基因实时定量PCR反应的标准品，通过绘制标准曲线(如摘要附图所示)，以标准曲线为标准，对待测样本细胞中的线粒体基因组的拷贝数进行定量和测算。本发明可以准确的定量检测脊尾白虾组织样本细胞中线粒体基因组的拷贝数，具有特异性高、操作简单的优点，只需普通荧光定量PCR仪就可以完成脊尾白虾线粒体基因组拷贝数的定量。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 脊尾白虾 线粒体 基因组 拷贝 定量 检测 方法 | ||
【主权项】：
一种脊尾白虾线粒体基因组拷贝数的定量检测方法，包括如下步骤：1)选择脊尾白虾细胞核基因组中的腺苷酸转移酶基因(ANT)和线粒体基因组中ATP6基因作为各自基因组的单拷贝基因；2)分别设计细胞核基因组和线粒体基因组单拷贝基因的荧光实时定量PCR扩增反应的引物和Taqman荧光探针；3)分别制作核基因组、线粒体基因组单拷贝基因的实时定量PCR反应的标准品及标准曲线；4)分别以待检DNA样本和核基因组、线粒体基因组单拷贝基因标准品为实时定量PCR反应的模板，进行TaqMan荧光定量PCR反应，根据标准品制作标准曲线，进一步根据标准曲线计算待检样本中细胞核基因组单拷贝基因和线粒体基因组单拷贝基因的拷贝数；5)根据如下公式获得待检样本组织每个细胞中的平均线粒体基因组拷贝数：线粒体基因组拷贝数/细胞＝2×线粒体单拷贝基因拷贝数/核基因组单拷贝基因拷贝数。
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