[发明专利]超临界二氧化碳萃取发酵芝麻饼粕中的木酚素

摘要

本发明公开了一种超临界CO₂萃取发酵芝麻饼粕中的木酚素。本发明按照下述步骤进行，1：芝麻饼粕发酵，种子悬液浓度为0.86×108cfu/mL摇匀，于28℃恒温条件下发酵4天；2：贮罐进行加热，当达到49℃时，向仪器中打压CO₂将气体液化，开启压缩机，关闭限压阀，进行CO₂循环，对系统进行加压，调节压力至14.75MPa时，开启阀门，平衡体系内压力，关闭CO₂气瓶，开始循环萃取；3：对上述木酚素粗提取液进行纯化。本发明得到的最佳萃取工艺条件为：萃取压力14.75MPa，萃取温度49℃，CO₂流量38.74L/h，此时得到木酚素的最大提取率为11.14％，纯化后的木酚素含量达到0.7802％。

主权项

1.一种超临界二氧化碳萃取发酵芝麻饼粕中木酚素的方法，其特征是，按照下述步骤进行：A.芝麻饼粕发酵：将芝麻饼粕经过烘焙干燥处理后，取烘干的脱脂芝麻饼粕加入同等质量的蒸馏水中，于121℃灭菌20min，冷却后，接种同蒸馏水体积的制备好的种子悬液，种子悬液浓度为0.86×10⁸cfu/mL摇匀，于28℃恒温条件下发酵4天，所述种子悬液的制备方法为：将斜面培养的酱油曲霉霉菌孢子在培养温度28℃，培养一周，然后使用接种环将菌种接入发酵培养基，28℃摇床培养5天，转速220rpm，加入100ml无菌生理盐水，用接种针刮下，调节菌液浓度为0.86×10⁸cfu/ml；B.按照CO₂气瓶→贮罐→高压泵→萃取釜→分离釜Ⅰ→分离釜Ⅱ→循环的流程进行萃取：将发酵后的芝麻饼粕投入萃取釜，分别对萃取釜、分离釜I、分离釜II、贮罐进行加热，当达到49℃时，向仪器中打压CO₂将气体液化，开启压缩机，关闭限压阀，进行CO₂循环，对系统进行加压，调节压力至14.75MPa时，开启阀门，平衡体系内压力，关闭CO₂气瓶，开始循环萃取，萃取过程保证恒温恒压，到达150min后，从出料口出料，得到含油脂和蛋白质的木酚素粗提取液；C.对上述木酚素粗提取液进行纯化：a.用石油醚将硅胶溶解，倒入层析柱中，使硅胶自然沉降；b.配置洗脱剂：乙酸乙酯：石油醚体积比：1：9；c.将上述准备的洗脱剂装入柱内，打开下端活塞，使洗脱剂缓慢流出，然后把硅胶慢慢连续不断地倒入柱内，用恒流泵保持液体流速恒定；d.取1ml木酚素粗提取液上样，然后加入洗脱剂，通过恒流泵将洗脱剂在恒定速率下对提取液进行提取纯化。