[发明专利]一种高效提取干燥植物DNA的方法在审

专利信息
申请号: 201610913850.X 申请日: 2016-10-19
公开(公告)号: CN106282168A 公开(公告)日: 2017-01-04
发明(设计)人: 任梦云;关潇;李俊生;陈彦君 申请(专利权)人: 中国环境科学研究院
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10
代理公司: 北京路浩知识产权代理有限公司11002 代理人: 王文君
地址: 100012 *** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明涉及一种高效提取干燥植物DNA的方法,运用改良的CTAB法与全式金植物基因组DNA提取试剂盒相结合的方法,能够有效去除多酚和糖类物质对DNA提取的干扰,尤其适应于临近干燥或枯萎的植物干燥叶片,能够有效地富集DNA,并消除颜色对DNA的影响。PCR实验结果证明本发明提取方法获得的DNA能够达到下游实验的要求。
搜索关键词: 一种 高效 提取 干燥 植物 dna 方法
【主权项】:
一种高效提取干燥植物DNA的方法,其特征在于,包括如下步骤:取干燥植物材料,粉碎,加入CTAB裂解缓冲液和一定体积的RnaseA,涡旋振荡;于65℃水浴30‑50min,加入等体积的氯仿‑异戊醇(24:1),颠倒混匀,离心,取上清,加入异丙醇沉淀DNA,离心,弃上清,用EB溶解沉淀,加入等体积的氯仿‑异戊醇(24:1),颠倒混匀,离心,取上清;加入等体积的BB1,颠倒混匀,将混合液转移至干净离心柱,离心;弃液体,加入适量的CB1,静置一定时间,离心;弃液体,加入适量的WB1,离心;弃液体,再加入适量的WB1,离心;弃液体,离心,彻底去除残留的WB1;用预热至60℃‑70℃的EB洗涤离心柱;离心,收集所得离心液,即得植物基因组DNA。
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