[发明专利]一种高通量测序检测无创亲子鉴定的方法

摘要

本发明公开一种高通量测序检测无创亲子鉴定的方法，包括以下步骤提取基因组DNA，包括提取孕妇新鲜血液中的胎儿游离DNA、提取孕妇DNA、提取疑似父亲的DNA；采用含有多个SNP位点的扩增子试剂盒进行PCR扩增，分别对胎儿游离DNA、孕妇DNA、疑似父亲的DNA进行富集；采用文库构建试剂盒对纯化好的多重PCR扩增产物进行文库构建；采用实时荧光定量PCR和Agilent 2100对构建好的文库进行质量控制，为上机测序做准备；测序，采用软件对上机测序结果进行生物信息学分析，鉴定出是否具有亲缘关系。本发明所述方法具有无创性、安全性、通量高、成本低等优点。

主权项

一种高通量测序检测无创亲子鉴定的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤a、提取基因组DNA，包括提取孕妇新鲜血液中的胎儿游离DNA、提取孕妇DNA、提取疑似父亲的DNA；步骤b、多重PCR扩增，利用多重PCR引物panel进行多重PCR扩增，并纯化扩增产物，采用含有多个SNP位点的扩增子试剂盒进行PCR扩增，分别对胎儿游离DNA、孕妇DNA、疑似父亲的DNA进行富集；步骤c、文库构建，即采用文库构建试剂盒对纯化好的多重PCR扩增产物进行文库构建；步骤d、文库质控，采用实时荧光定量PCR和Agilent 2100对构建好的文库进行质量控制，为上机测序做准备；步骤e、测序，采用二代测序仪，包括Ion Torrent平台或Illumina平台的测序仪进行上机测序；步骤f、数据分析，采用软件对上机测序结果进行生物信息学分析，进行亲子鉴定判断，并进行生物信息学数据分析，分析胎儿、孕妇和疑似父亲的DNA的SNP位点，并进行比对，鉴定出是否具有亲缘关系。