[发明专利]大花金钱豹的快速繁殖方法

摘要

本发明公开了一种大花金钱豹的快速繁殖方法，以大花金钱豹成熟浆果为外植体，经消毒、灭菌后在无菌条件下切开浆果取出大花金钱豹种子，经萌发培养得到的萌发苗依次进行初代培养、继代培养、生根培养和炼苗移栽。本发明通过以大花金钱豹成熟浆果为外植体，取其种子经萌发培养后诱导出丛生芽而不经过愈伤组织阶段，大大减少了变异的可能性，有利于保持种苗的优良性状。

主权项

一种大花金钱豹的快速繁殖方法，其特征在于，以大花金钱豹成熟浆果为外植体，经消毒、灭菌后在无菌条件下切开浆果取出大花金钱豹种子，经萌发培养得到的萌发苗依次进行初代培养、继代培养、生根培养和炼苗移栽；大花金钱豹种子接种至萌发培养基上进行萌发培养7‑10天得萌发苗，所述萌发培养基的配方为：MS+1.5mg/L 6‑BA+0.5mg/LGA₃+300mg/L PVP，萌发培养的条件为：温度为24‑28℃、光照强度为2000Lx、光照时间为10h/天；初代培养的具体步骤为：将萌发培养得到的萌发苗切去根部后接种至诱导培养基上培养15‑20天，得到丛生芽，其中，初代培养的条件为：温度为24‑28℃、光照强度为2000Lx、光照时间为10h/天；诱导培养基的配方为：MS+2.5mg/L 6‑BA+0.5mg/L KT+0.5mg/L TDZ+0.2mg/L NAA+300mg/L PVP+200mg/L水解酪蛋白；继代培养的具体步骤为：将初代培养得到的丛生芽在无菌条件下切下含有2‑3个芽的芽丛转接至增殖培养基中进行继代培养，培养周期为15‑20天，继代培养的条件为：温度24‑28℃、光照强度为2000Lx、光照时间为10h/天；增殖培养基的配方为：MS+2.0mg/L 6‑BA+0.5mg/L KT+0.2mg/L TDZ+0.2mg/L NAA；生根培养的具体步骤为：当继代培养得到的芽苗长至2cm以上时，从基部切成单个芽，转接至生根培养基中培养20天得到生根苗，生根培养的条件为：温度24‑28℃、光照强度为2000Lx、光照时间为10h/天；生根培养基的配方为：1/2MS+1.5mg/L IBA+0.5mg/L ABT₁；炼苗移栽的具体步骤为：将生根培养得到的生根苗开盖炼苗4天，然后将生根苗取出，清水洗去其根部的生根培养基，移栽至细河沙苗床上得移栽苗，移栽后的10天内保持环境中相对湿度为95％，控制白天温度为23‑25℃，夜间温度为15‑18℃，移栽后的15天后上杯种植，移栽后的30天后进行大田栽培。