[发明专利]一种将低值化合物转化为咖啡酸的高效生物合成方法有效
| 申请号： | 201610928576.3 | 申请日： | 2016-10-31 |
| 公开（公告）号： | CN106497990B | 公开（公告）日： | 2019-08-06 |
| 发明（设计）人： | 周景文;陈坚;吕永坤;堵国成 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12P7/42 | 分类号： | C12P7/42;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 张勇 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种将低值化合物转化为咖啡酸的高效生物合成方法，属于生物化工领域。本发明中，酪氨酸苯裂合酶以邻苯二酚、丙酮酸和氨作为底物合成左旋多巴，酪氨酸氨基裂合酶将左旋多巴转化为反‑咖啡酸和NH3。由于邻苯二酚、丙酮酸钠和氯化铵均为相对廉价的化合物，因此本发明创建了一种将低值化合物转化为咖啡酸的生物合成方法，且易于大规模生产。与化学合成方法相比，该方法的产物为单一的反‑咖啡酸，不需要对同分异构体进行进一步的分离。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 低值 化合物 转化 咖啡 高效 生物 合成 方法 | ||
【主权项】：
1.一种咖啡酸的生物合成方法，其特征在于，以一种共表达酪氨酸苯裂合酶EhTPL和酪氨酸氨基裂合酶TcXAL的重组大肠杆菌，催化底物邻苯二酚、丙酮酸钠和氯化铵，合成咖啡酸；所述的酪氨酸苯裂合酶EhTPL来源于草生欧文氏菌(Erwinia herbicola)，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述的酪氨酸氨基裂合酶TcXAL来源于皮状丝孢酵母(Trichosporon cutaneum)，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；全细胞转化体系中重组大肠杆菌的浓度是OD600＝18±1；底物为10–100mM的邻苯二酚，NH4Cl、丙酮酸钠和邻苯二酚的浓度的比例为13：1：1；反应温度为25–42℃。
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