[发明专利]一种用于矫正重症β‑地中海贫血患者自体造血干细胞的HBB基因试剂盒在审
| 申请号： | 201610930594.5 | 申请日： | 2016-10-31 |
| 公开（公告）号： | CN106497976A | 公开（公告）日： | 2017-03-15 |
| 发明（设计）人： | 邢晓;王雯倩;宋珂慧;郭栋;麦玉蝉;陈莉;郭伟 | 申请（专利权）人： | 广东铱科基因科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/867 | 分类号： | C12N15/867;C12N5/10;A61K48/00;A61K35/28 |
| 代理公司： | 济南金迪知识产权代理有限公司37219 | 代理人： | 王绪银 |
| 地址： | 523000 广东省东莞市松山湖高新技术产业开发*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种用于矫正重症β‑地中海贫血患者自体造血干细胞的HBB基因试剂盒，是由一套用于制备特异性HBB‑101 HIV慢病毒的试剂和一套HIV慢病毒侵染造血干细胞的试剂组成。本发明还公开了所述试剂盒在使重症β‑地中海贫血患者自体造血干细胞转变为能具有正常合成β‑珠蛋白功能的造血干细胞中的应用。实验证实本发明的试剂盒操作简单，病毒滴度较高，病毒感染效率高达56.99％，对矫正后的造血干细胞进行PCR鉴定和DNA测序鉴定阳性后即可进行静脉回输从而实现治愈重症β‑地中海贫血患者的目的，在临床研究及治疗应用上发展前景广阔。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 用于 矫正 重症 地中海贫血 患者 造血 干细胞 hbb 基因 试剂盒 | ||
【主权项】：
一种用于矫正重症β‑地中海贫血患者自体造血干细胞的HBB基因试剂盒，由一套用于制备特异性HBB‑101HIV慢病毒的试剂和一套HIV慢病毒侵染造血干细胞的试剂组成；其特征在于：所述用于制备特异性HBB‑101HIV慢病毒的试剂是：浓度为500～1000ng/μl特异性pSIN HBB‑101HIV慢病毒表达质粒500μl，用于阴性对照的浓度为500～1000ng/μl绿色荧光蛋白基因(GFP)标记的pSIN GFP HIV慢病毒表达质粒200μl，浓度为500～1000ng/μl psPAX2包装质粒200μl，浓度为500～1000ng/μl pMD2G包装质粒200μl，浓度为0.1～5M的CaCl2 10ml，2×HBS水溶液100ml；其中，所述2×HBS水溶液中含有280mM NaCl、1.5mM Na2HPO4和50mM 4‑羟乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)；所述HIV慢病毒侵染造血干细胞的试剂是：浓度为0.5mg/ml聚凝胺(polybrene)5μl，灭菌双蒸水5ml。
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