[发明专利]一种GyV7环形病毒VP3蛋白制备方法在审
| 申请号： | 201610937104.4 | 申请日： | 2016-11-01 |
| 公开（公告）号： | CN106349348A | 公开（公告）日： | 2017-01-25 |
| 发明（设计）人： | 叶建强;申秋平;邵红霞;秦爱建;田晓彦;万志敏 | 申请（专利权）人： | 扬州大学 |
| 主分类号： | C07K14/01 | 分类号： | C07K14/01;C12N15/70;C12N15/11 |
| 代理公司： | 南京钟山专利代理有限公司32252 | 代理人： | 戴朝荣,宁菁 |
| 地址： | 225009 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种GyV7环形病毒VP3蛋白制备方法。该方法基于重组酶ExnaseTM II将线性化的pGEX‑6p‑1载体与GyV7病毒VP3基因片段PCR产物不经酶切连接反应，直接重组克隆技术；并转化到大肠杆菌，实现VP3蛋白表达；其中，用于PCR扩增GyV7病毒VP3基因的上、下游引物的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。该方法操作简单、快速高效，获得的GyV7病毒VP3表达及纯化的蛋白，可直接提供VP3蛋白作为GyV7诊断抗原；作为免疫原获得抗VP3多克隆抗体；为开展GyV7流行病学调查提供有效诊断试剂；并为进一步探究VP3生物学功能具有重要意义。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 gyv7 环形 病毒 vp3 蛋白 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种GyV7环形病毒VP3蛋白制备方法，其特征在于，该方法基于重组酶ExnaseTM II将线性化的pGEX‑6p‑1载体与GyV7病毒VP3基因片段PCR产物不经酶切连接反应，直接重组克隆技术；并转化到大肠杆菌，实现VP3蛋白表达；其中，用于PCR扩增GyV7病毒VP3基因的引物分为上、下游引物，所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，所述下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。
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