[发明专利]CYP101酶重组载体及构建方法、CYP101酶高效表达纯化方法在审
| 申请号： | 201610938377.0 | 申请日： | 2016-10-25 |
| 公开（公告）号： | CN106497956A | 公开（公告）日： | 2017-03-15 |
| 发明（设计）人： | 黄娟;徐沁;洪亮 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N1/21;C12N15/66;C12N9/02 |
| 代理公司： | 上海科盛知识产权代理有限公司31225 | 代理人： | 褚明伟 |
| 地址： | 200240 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及CYP101酶重组载体及构建方法、CYP101酶高效表达纯化方法，属于生物技术领域。本发明中构建了PET28a‑CYP101的高效表达载体，并将其转化于BL21 plysS菌株中，诱导表达后，利用简单两步纯化方法即亲和层析和离子交换层析，得到纯度大于95％的高纯酶。与现有技术相比，本发明对CYP101生产简单高效，成本低廉，纯化方便，每升培养基可获得23mg纯度95％以上的目的蛋白。本发明可用于CYP101酶的表达纯化，极大地提高了实验室生产的效率，同时极大的降低了实验成本。对于大规模生产纯化CYP101酶具有很好的应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | cyp101 重组 载体 构建 方法 高效 表达 纯化 | ||
【主权项】：
CYP101酶重组载体，其特征在于，为重组质粒pET28a‑CYP101，其中CYP101酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
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