[发明专利]一种用于检测药物性耳聋相关位点的非标记探针有效
申请号: | 201610940206.1 | 申请日: | 2016-11-01 |
公开(公告)号: | CN106957902B | 公开(公告)日: | 2020-12-04 |
发明(设计)人: | 卢大儒;陈红岩;陈弘远;丁嘉琦;王超 | 申请(专利权)人: | 复旦大学 |
主分类号: | C12Q1/6883 | 分类号: | C12Q1/6883;C12Q1/6858;C12N15/11 |
代理公司: | 北京市诚辉律师事务所 11430 | 代理人: | 唐宁 |
地址: | 200433 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及一组用于检测药物性耳聋相关位点的非标记探针。分别针对两个位点设计与突变型序列完全匹配、3’端氨基封闭的非标记探针,通过高分辨率熔解曲线分析(HRM)结合非标记探针,检测嵌入双链DNA的饱和染料EvaGreen荧光值的变化,得到探针与不同基因型目的片段解链的Tm值,并通过野生型和突变型不同的Tm值对其进行区分。分别成功地区分了两个位点的野生型和突变型个体,实现了对两个突变位点的单重检测。本体系适用于检测线粒体DNA中C1494T和A1555G突变,具有结果准确、可靠,重复性好,价格低廉的特点。 | ||
搜索关键词: | 一种 用于 检测 药物性 耳聋 相关 标记 探针 | ||
【主权项】:
一种通过高分辨率熔解曲线分析检测氨基糖甙类抗生素诱导的非综合征型耳聋相关位点12S rRNA C1494T、A1555G突变基因型的试剂盒,其特征在于,所述的试剂盒包括:(1)扩增C1494T和A1555G突变区域的两组引物对;(2)两条分别特异性结合由两组引物对扩增的片段的非标记探针;(3)必要的核酸扩增和杂交试剂。
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