[发明专利]一种检测药物性耳聋的PCR荧光分子信标探针有效
| 申请号： | 201610940326.1 | 申请日： | 2016-11-01 |
| 公开（公告）号： | CN106957904B | 公开（公告）日： | 2019-05-21 |
| 发明（设计）人： | 熊乾斌 | 申请（专利权）人： | 上海泽因生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6883 | 分类号： | C12Q1/6883;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京市诚辉律师事务所 11430 | 代理人： | 唐宁;梁婧文 |
| 地址： | 200433 上海*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种检测药物性耳聋的PCR荧光分子信标探针。分别针对每个位点设计与野生型序列完全匹配的分子信标探针，通过高分辨率熔解曲线分析(HRM)，检测随着温度升高各个通道的荧光强度变化情况，得到探针与不同基因型目的片段解链的Tm值，由于野生型和突变型具有不同的Tm值，可以实现对样品分型的目的。体系能准确区分两个位点的基因型，实现了在一个反应中同时对两个位点进行分型的目的。本体系适用于同时检测线粒体DNA中C1494T和A1555G突变，具有结果准确可靠、操作简便、检测成本低的特点。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 检测 药物性 耳聋 pcr 荧光 分子 信标 探针 | ||
【主权项】：
1.一种通过高分辨率熔解曲线分析检测氨基糖甙类抗生素诱导的非综合征型耳聋相关位点12SrRNA C1494T、A1555G突变基因型的试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒包括：(1)扩增覆盖C1494T和A1555G突变区域的一组引物对；所述的引物对的核酸序列分别为：Seq ID No.2所示的引物1：5’GAGTAGAGTGCTTAGTTGAACAGGG 3’；Seq ID No.3所示的引物2：5’AAGTGTAAGTTGGGTGCTTTGTG 3’；(2)两条分别特异性结合扩增的片段上相应的突变区的荧光分子信标探针；所述的荧光分子信标探针的序列为：Seq ID No.4所示的探针1：5’CCCGTCACCCTCCTCAAGTATACGGG 3’；Seq ID No.5所示的探针2：5’CCCGAGGAGACAAGTCGTAACATCGGG 3’(3)必要的核酸扩增和杂交试剂。
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