[发明专利]一种提高肝素酶I活性的工程菌株构建方法在审
申请号: | 201610943394.3 | 申请日: | 2016-10-26 |
公开(公告)号: | CN106497897A | 公开(公告)日: | 2017-03-15 |
发明(设计)人: | 罗学刚;杨宝成;张同存 | 申请(专利权)人: | 天津科技大学 |
主分类号: | C12N9/24 | 分类号: | C12N9/24;C12N15/70;C12P19/26;C12P19/16 |
代理公司: | 天津盛理知识产权代理有限公司12209 | 代理人: | 赵瑶瑶 |
地址: | 300222 天津市河*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明涉及一种高活性的肝素酶I及其高效可溶性基因工程表达生产方法。依照肝素酶I的空间结构分析对其氨基酸序列进行优化,获得比酶活提高48%的Hep169。然后根据密码子偏爱性优化HepI169基因,通过人工合成获得基因DNA,克隆到表达载体中与SUMO等标签进行融合表达,转化宿主细胞、筛选建立了Hep169的可溶性基因工程表达生产体系,分析结果显示目的蛋白获得了高效的可溶性表达,且具有很好的生物学活性,能高效的裂解肝素生成低分子量肝素。本发明方法不仅提供了一种高活性的HepI,而且为肝素酶I的高效可溶性基因工程表达生产提供了一种新方法,可有效降低低分子肝素等药物的生产成本,具有广泛的应用前景。 | ||
搜索关键词: | 一种 提高 肝素 活性 工程 菌株 构建 方法 | ||
【主权项】:
一种高活性的肝素酶I(HepI)及其高效可溶性基因工程表达生产方法,其特征在于:依照肝素酶I的空间结构分析,改造获得一种比酶活较野生型提高48%的高活性肝素酶Hep169,然后利用分子生物学技术建立了Hep169的高效可溶性基因工程表达体系。
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