[发明专利]一种同时检测红葡萄酒中4‑乙基苯酚与4‑乙基愈创木酚含量的方法

摘要

本发明属于食品检测领域，涉及一种红葡萄酒中4‑乙基苯酚(4‑EP)与4‑乙基愈创木酚(4‑EG)含量的同时测定方法，特别是涉及一种通过顶空固相微萃取‑气相色谱‑质谱联用进行检测的方法。本发明的目的是填补目前红葡萄酒中4‑EP和4‑EG相关检测方法领域的不足，通过摸索最佳顶空固相微萃取条件和最佳气相色谱‑质谱分离条件而提供一种红葡萄酒中4‑EP和4‑EG含量的同时测定方法。所述方法主要步骤包括：内标物的制备、顶空固相微萃取、标准曲线的测定、气相色谱‑质谱检测。根据得到的标准曲线计算样品中4‑EP和4‑EG的含量。经验证，本方法快速、准确、方便，精密度和回收率均较高。

主权项

一种同时检测红葡萄酒中4‑乙基苯酚与4‑乙基愈创木酚含量的方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：a.内标物的制备：精确称取1mg纯度为色谱纯的对‑甲酚标准品，用纯度为色谱纯的乙醇定容在1mL棕色容量瓶中，‑20℃冰箱保存，作为内标物使用；b.顶空固相微萃取：在装有磁力搅拌器的15mL顶空瓶中加入待测红葡萄酒样品10mL，加入步骤a中制备的内标物100μL和NaCl；将顶空瓶置于磁力加热搅拌装置上，在50℃预先加热平衡10min，调整磁力搅拌转速为850rpm，插入萃取头；c.标准曲线的测定：分别精确称取纯度为色谱纯的4‑EP标准品1mg和纯度为色谱纯的4‑EG标准品1mg，用纯度为色谱纯的乙醇定容在1mL棕色容量瓶中，‑20℃冰箱保存；用纯度为色谱纯的乙醇稀释，分别配制50μg/L、100μg/L、500μg/L、1000μg/L、2000μg/L和3000μg/L的4‑EP标准品溶液；5μg/L、10μg/L、50μg/L、100μg/L、200μg/L、500μg/L和1000μg/L的4‑EG标准品溶液；在装有磁力搅拌器的15mL顶空瓶中分别加入上述标准品溶液10mL，加入步骤a中制备的内标物100μL和NaCl；将顶空瓶置于磁力加热搅拌装置上，在50℃预先加热平衡10min，调整磁力搅拌转速为850rpm，插入萃取头；d.气相色谱‑质谱检测：将上述步骤b、c的萃取手柄分别插入气相色谱仪的进样口进样，解析5min，得到待测红葡萄酒样品溶液中4‑EP、4‑EG和内标物的峰面积，以及4‑EP标准品、4‑EG标准品和内标物的峰面积；e.标准曲线的计算：以标准品峰面积与内标物峰面积之比为响应值A，即响应值A＝标准品峰面积/内标物峰面积；根据响应值与标准品溶液浓度之间存在的线性关系，制成标准曲线；f.待测红葡萄酒样品中4‑EP、4‑EG浓度的计算：以待测红葡萄酒样品中4‑EP、4‑EG的峰面积分别与内标物的峰面积之比为响应值B4‑EP、B4‑EG，即B4‑EP＝待测红葡萄酒样品中4‑EP峰面积/内标物峰面积，B4‑EG＝待测红葡萄酒样品中4‑EG峰面积/内标物峰面积；根据步骤e中得到的标准曲线计算待测红葡萄酒样品中4‑EP、4‑EG浓度；其中，所述步骤d中，1)气相色谱检测条件：气相色谱进样方式为SPME无分流进样；气相色谱升温程序为初始温度50℃保持3分钟，之后以10℃/min升至150℃，再以5℃/min升至180℃，再以10℃/min升至210℃，保持16min；2)质谱条件：质谱仪电离源为EI电离源，电子能量为70eV，扫描范围(m/z)：50～500AMU，离子源温度250℃。