[发明专利]一种DNA疫苗浸泡免疫预防鳜鱼ISKNV的方法在审
| 申请号： | 201610945395.1 | 申请日： | 2016-10-26 |
| 公开（公告）号： | CN106310295A | 公开（公告）日： | 2017-01-11 |
| 发明（设计）人： | 周伟东;喻婷;刘奕;张立强;邓平;艾桃山;徐洪亮 | 申请（专利权）人： | 武汉市农业科学技术研究院水产科学研究所 |
| 主分类号： | A61K48/00 | 分类号： | A61K48/00;A61K39/12;A61P31/20;C12N15/66 |
| 代理公司： | 湖北武汉永嘉专利代理有限公司42102 | 代理人： | 乔宇,徐晓琴 |
| 地址： | 430065 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明属于水产养殖和医药生物工程领域，具体涉及一种DNA疫苗浸泡免疫预防鳜鱼ISKNV的方法。所述方法包括：以ISKNV核酸为模板，利用引物扩增MCP基因序列，将PCR产物克隆到真核表达质粒pcDNA3.1(+)中，构建得到DNA疫苗真核表达质粒pcMCP；将鳜鱼浸泡在免疫浸泡液中进行DNA疫苗浸泡免疫；免疫后的鳜鱼置于25℃环境下、投喂鲮鱼进行恒温养殖。本发明通过构建DNA疫苗并采用DNA疫苗浸泡免疫的方式对鳜鱼苗进行免疫，经试验证明，采用本发明所述方法免疫后，能够有效激活鳜鱼的体液免疫，有效提高鳜鱼脾脏中Mx mRNA的表达量从而提高抗病毒能力，能够显著降低ISKNV病毒感染鳜鱼的死亡率。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 dna 疫苗 浸泡 免疫 预防 鳜鱼 isknv 方法 | ||
【主权项】：
一种DNA疫苗浸泡免疫预防鳜鱼ISKNV的方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）DNA疫苗的构建：以ISKNV核酸为模板，利用引物扩增MCP基因全长序列，并将PCR产物MCP基因克隆到真核表达质粒pcDNA3.1(+)中，构建得到DNA疫苗真核表达质粒pcMCP；（2）DNA疫苗浸泡免疫：取1~4厘米长的鳜鱼浸泡在免疫浸泡液中进行DNA疫苗浸泡免疫，所述免疫浸泡液为含有pcMCP真核表达质粒的磷酸盐缓冲液；（3）将浸泡免疫后的鳜鱼置于25℃环境下、投喂鲮鱼进行恒温养殖。
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