[发明专利]一种多层纳米金球的液相开管柱及其制作方法和应用

摘要

本发明属于生物技术领域，具体为一种多层纳米金球的液相开管柱及其制作方法和应用。本发明中，首先在毛细管内壁上修饰氨基；将纳米金溶胶置入气瓶，利用钢瓶内的气体将金溶胶压入毛细管，金溶胶中的纳米金球在毛细管内壁自组装；往修饰上第一层纳米金球的毛细管内通入二巯基试剂，再次通入金溶胶，毛细管内壁的金层上自主装第二层纳米金球；重复上述步骤，毛细管内壁即可自组装上多层纳米金球；最后向毛细管内通入巯基试剂，制作成毛细管液相开管柱。制作成功的固定相为多层纳米金球的液相开管柱可用于10‑1000个细胞蛋白质和肽的色谱分离。

主权项

1.一种多层纳米金球的液相开管柱的制作方法，其特征在于，具体步骤为：/n（1）首先，预处理毛细管内壁，并通入氨基硅烷偶联剂反应，在毛细管内壁修饰氨基；/n（2）然后，将纳米金溶胶通过气体压入内壁修饰了氨基的毛细管中，在毛细管内壁自主装上第一层金球；/n（3）再将二巯基试剂通入内壁修饰了第一层纳米金球的毛细管中，在第一层金球上修饰巯基；/n（4）再将纳米金溶胶通过气体压入内壁修饰了带巯基的纳米金球的毛细管中，在毛细管内壁自主装上第二层金球；/n（5）重复通入二巯基试剂和纳米金溶胶的步骤，在毛细管内壁自主装上更多层金球；/n（6）最后向毛细管内通入巯基试剂，使内壁自组装了多层纳米金球的毛细管成为液相开管柱；/n具体操作流程如下：/n（1）取一根200-1000 μm外径、5-500 μm内径、长度1-1000 cm的玻璃或石英毛细管，4-50 ℃下，依次用0.1-1 mol/L NaOH、水、0.1-1 mol/L HCl、水、CH₃CN分别冲洗5-30 min；/n（2）将氨基硅烷偶联剂反应液通入流程（1）所得毛细管中，20-150 ℃下加热反应0.5-24 h；硅烷偶联反应完成后用溶剂洗净；/n（3）将纳米金球颗粒直径为1-100 nm的金溶胶置于瓶口具有橡胶塞的气瓶中；气瓶和钢瓶之间用内径为5-500 μm内径的石英毛细管连接；将流程（2）所得毛细管直接插在气瓶内的金溶胶中；在4-50 ℃、0.1-10 bar压力下，使用气体钢瓶的气体，将10-1000倍毛细管体积金溶胶压入毛细管中；/n（4）将二巯基试剂置于瓶口具有橡胶塞的气瓶中；气瓶和钢瓶之间用内径为5-500 μm内径的石英毛细管连接；将流程（3）所得毛细管直接插在气瓶内的二巯基试剂中；在4-50℃、0.1-10 bar压力下，使用气体钢瓶的气体，将10-1000倍毛细管体积二巯基试剂压入毛细管中；/n（5）将纳米金球颗粒直径为1-100 nm的金溶胶置于瓶口具有橡胶塞的气瓶中；气瓶和钢瓶之间用内径为5-500 μm内径的石英毛细管连接；将流程（4）所得毛细管直接插在气瓶内的金溶胶中；在4-50 ℃、0.1-10 bar压力下，使用气体钢瓶的气体，将10-1000倍毛细管体积金溶胶压入毛细管中；/n（6）重复流程（4）和流程（5），重复次数1到20次；/n（7）将巯基试剂置于瓶口具有橡胶塞的气瓶中；气瓶和钢瓶之间用内径为5-500 μm内径的石英毛细管连接；将流程（6）所得毛细管直接插在气瓶内的巯基试剂中；在4-50 ℃、0.1-10 bar压力下，使用气体钢瓶的气体，将10-1000倍毛细管体积巯基试剂压入毛细管中；即得到固定相为多层纳米金球的液相开管柱。/n