[发明专利]一种副猪嗜血杆菌5型500L发酵罐的高密度培养方法有效
| 申请号： | 201610948591.4 | 申请日： | 2016-10-26 |
| 公开（公告）号： | CN106434479B | 公开（公告）日： | 2020-05-08 |
| 发明（设计）人： | 顾伟;徐高原;陈关平;周明光;金建云;曹毅;韩进;林晗;田苏英;金梅林 | 申请（专利权）人： | 武汉科前生物股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12R1/21 |
| 代理公司： | 湖北武汉永嘉专利代理有限公司 42102 | 代理人： | 乔宇 |
| 地址： | 430070 湖北省武*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： |
本发明涉及一种副猪嗜血杆菌5型500L发酵罐的高密度培养方法。该方法步骤如下：A、将冻干副猪嗜血杆菌5型用TSA平板活化18～24h，至单菌落长出；B、挑取4～8个单菌落至TSB摇瓶一级种子培养基中，培养6～14h至OD |
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| 搜索关键词： | 一种 嗜血 杆菌 500 发酵 高密度 培养 方法 | ||
【主权项】：
一种副猪嗜血杆菌5型500L发酵罐的高密度培养方法，其特征在于：步骤如下：A、将冻干副猪嗜血杆菌5型用TSA平板活化18～24h，至单菌落长出；B、挑取4～8个单菌落至TSB摇瓶一级种子培养基中，培养6～14h至OD600值达到0.8～1.6；C、以1％～5％V/V接种量将一级种子液转接自配二级摇瓶种子培养基，培养8～14h至OD600值达到2.0～3.5；D、将二级种子液以1％～5％V/V接种量接种于500L发酵罐的灭菌培养基中，发酵罐中盛有发酵罐培养基，培养条件为：温度35～39℃、罐压0.02～0.1Mpa、溶氧20～50％、pH7.3～7.8，培养至pH值稳定及溶氧回升时，放罐收菌，得到高密度的副猪嗜血杆菌5型菌体；所述的二级种子培养基和发酵罐培养基成分均为：胰蛋白胨1～20g/L、酵母粉5～50g/L、酵母浸膏1～10g/L、氯化钠1～10g/L、醋酸铵1～10g/L、pH为7.4的1M磷酸缓冲液1％～30％V/V及添加一定量的牛血清5％～30％V/V和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸0.01～0.1mg/L。
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