[发明专利]携带致倦库蚊沃尔巴克氏体的白纹伊蚊的制备方法及应用

摘要

本发明公开了一种稳定携带致倦库蚊沃尔巴克氏体的白纹伊蚊的制备方法及其在防治白纹伊蚊中的应用，制备方法包括以下步骤：筛选四环素处理的广州野外白纹伊蚊得到除去沃尔巴克氏体的白纹伊蚊、制备稳定携带致倦库蚊沃尔巴克氏体的白纹伊蚊；上述稳定携带致倦库蚊沃尔巴克氏体的白纹伊蚊在防治白纹伊蚊中的应用具有低成本、可持续以及绿色环保等特点，是目前最具潜力的蚊媒病生物防治手段之一，解决了化学杀虫剂的使用很容易使昆虫建立抗药性的问题，也解决了对环境和公众健康产生危害的问题。

主权项

1.一种稳定携带致倦库蚊沃尔巴克氏体的白纹伊蚊的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：(1)筛选四环素处理的广州本地野外白纹伊蚊得到除去沃尔巴克氏体的白纹伊蚊：将浓度为10mg/ml盐酸四环素溶液与质量分数为10％的蔗糖溶液按体积比1:10混合，喂食广州本地野外白纹伊蚊成蚊，7天后提供血餐，血餐三天后放产卵杯供其产卵，处理两代100％去除野外白蚊伊蚊体内的沃尔巴克氏体，得到除去沃尔巴克氏体的白纹伊蚊，简称白纹伊蚊GT；(2)制备稳定携带致倦库蚊沃尔巴克氏体的白纹伊蚊：包括两个步骤：a、用胚胎注射法提取沃尔巴克氏体转染蚊子胚胎得到转染成功的携带致倦库蚊沃尔巴克氏体的白纹伊蚊；b、步骤a得到的转染成功的携带致倦库蚊沃尔巴克氏体的白纹伊蚊的筛选、鉴定和扩增；步骤a所述用胚胎注射法提取沃尔巴克氏体转染蚊子胚胎具体包括三个步骤：胚胎注射针头的制备、致倦库蚊和GT胚胎的收集和准备、显微胚胎注射；步骤b所述转染成功的携带致倦库蚊沃尔巴克氏体的白纹伊蚊的筛选、鉴定和扩增，具体包括三个步骤：孵化胚胎注射后的蚊卵并培育获得携带致倦库蚊沃尔巴克氏体的白纹伊蚊雌蚊、获取携带致倦库蚊沃尔巴克氏体的白纹伊蚊雌蚊与GT公蚊交配后的子代、在子代中筛选并扩增转染成功的携带致倦库蚊沃尔巴克氏体的白纹伊蚊蚊株。