[发明专利]一种用于同步检测4种虫传病毒的多重RT-PCR方法有效
申请号: | 201610971730.5 | 申请日: | 2016-11-07 |
公开(公告)号: | CN106521028B | 公开(公告)日: | 2019-11-29 |
发明(设计)人: | 王锡锋;张培培;刘艳 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院植物保护研究所 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/686 |
代理公司: | 11333 北京兆君联合知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人: | 胡敬红<国际申请>=<国际公布>=<进入 |
地址: | 100193 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明具体属于农业生物分子生物学检测领域,公开了一种一种用于同步检测4种虫传病毒的多重RT-PCR方法,该PCR体系中含有4对特异性引物(SEQ ID NO1~8),在一个PCR体系中同步对4种病毒进行扩增,得到273、565、783、1296bp的特异性条带,建立并优化了能同步检测RBSDV、BYSMV、WDV和NCMV的多重RT‑PCR鉴定体系。检测结果表明优化后的多重RT‑PCR体系能在田间样品中快速、高效地检测出4种病毒,准确度高,灵敏性好。对监测小麦上NCMV等4种虫传病毒病在田间的发生情况以及病害流行预测具有十分重要的意义。 | ||
搜索关键词: | 一种 用于 同步 检测 种虫传 病毒 多重 rt pcr 方法 | ||
【主权项】:
1.一种用于同步检测RBSDV、BYSMV、WDV和NCMV4种虫传病毒的多重RT-PCR方法,在同一PCR体系中,包含有如下特异性引物对:/n扩增RBSDV病毒的特异性引物的核苷酸序列为:/nSEQ ID NO.1:5′-ACGAACAACGACCTAAGTGA-3′,/nSEQ ID NO.2:5′-AAGTATTCCCATTTGAGCAG-3′;/n扩增BYSMV病毒的特异性引物的核苷酸序列为:/nSEQ ID NO.3:5′-TGGGACTCTTCAGGTTGTGG-3′,/nSEQ ID NO.4:5′-CTGGCTGTTGGATTCATTTCTC-3′;/n扩增WDV病毒的特异性引物的核苷酸序列为:/nSEQ ID NO.5:5′-TCTTCAAAGGTTTGCGTGTC-3′,/nSEQ ID NO.6:5′-GGGAGGCATAAGTCCATCTA-3′;/n扩增NCMV病毒的特异性引物的核苷酸序列为:/nSEQ ID NO.7:5′-CTATGCAAGAACAAAGCAGGAT-3′,/nSEQ ID NO.8:5′-ACCGACAGTAATGAAGAGGC-3′。/n
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