[发明专利]一种铜绿微囊藻的培养方法

摘要

本发明涉及一种铜绿微囊藻的培养方法，包括以下具体步骤：a、前期准备；b、铜绿微囊藻的预培养；c、铜绿微囊藻的接种及培养。通过上述，本发明的铜绿微囊藻的培养方法，在培养铜绿微囊藻时具有存活率高，生长速率快的特点，培养过程中藻液不会变黄，而且不易被其他细菌污染。

主权项

一种铜绿微囊藻的培养方法，其特征在于，包括以下具体步骤：a、前期准备：准备藻种、培养箱以及培养过程中需要用到的玻璃器皿，培养箱需用紫外灯对其灭菌12 小时以上；玻璃器皿用清洗剂进行刷洗，然后用自来水进行冲洗，再用10%的稀盐酸溶液浸泡12小时，接着用蒸馏水重复冲洗几次，最后放置于烘箱中使其烘干；藻种放到高压蒸汽灭菌锅中于110 kPa、120℃条件下灭菌30分钟，待其自然冷却至室温后方可使用；b、铜绿微囊藻的预培养：在纯化培养之前的两三周内，将藻种转至玻璃器皿内，玻璃器皿中加入的BG‑11培养基，设置好温度、光照及光暗比后将玻璃器皿放置于光照的培养箱中，开始驯化和扩大培养，培养2周后观察藻种生长状况是否良好，当藻种处于对数期后期时，将藻种转接到新的BG‑11培养基当中，按上述方法进行培养，并确保所用到的玻璃器皿在接种过程中是无菌的且未被二次污染，在连续如此培养2‑3次后，用镜检观察确认在藻液中有无其他藻类或微生物，如没有受到污染且藻种生长良好，则可作为待接种藻种液；c、铜绿微囊藻的接种及培养：选取以上多次预培养的藻种，采用光学显微镜下进行操作，选用血小板细胞计数法，在400倍的条件下进行观察操作，由以上得出的结果转换成藻种液的浓度，即每毫升的细胞数目；将选取的藻种置于玻璃器皿内，玻璃器皿中加入的BG‑11培养基，接种藻密度均为5×104cells mL‑1，设置好温度、光照及光暗比后将玻璃器皿放置于光照的培养箱中，开始纯化培养，培养过程中为防止藻种粘附在玻璃器皿的内壁上，每天需间隔一段时间轻摇玻璃器皿三次。