[发明专利]原位实时监测植物中果糖含量的微电极生物传感器及其应用有效
| 申请号： | 201610974270.1 | 申请日： | 2016-11-04 |
| 公开（公告）号： | CN106525939B | 公开（公告）日： | 2018-07-06 |
| 发明（设计）人： | 李爱学;王成;胡叶;侯佩臣;王晓冬;罗斌;宋鹏;潘大宇;路文超;周亚男 | 申请（专利权）人： | 北京农业信息技术研究中心 |
| 主分类号： | G01N27/327 | 分类号： | G01N27/327;G01N27/416 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 王文君 |
| 地址： | 100097 北京市海淀区*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明涉及微电极生物传感技术，具体公开了一种原位实时监测植物中果糖含量的微电极生物传感器。本发明在工作电极上通过滴涂方法组装巯基乙酸，然后吸附离子液体[Bmim]PF6，进一步修饰果糖脱氢酶与铁氰化钾媒介体小分子的混合物，之后重复这一过程，实现离子液体与果糖脱氢酶的多层修饰工作电极，果糖脱氢酶可以催化D‑果糖生成5‑keto‑D‑果糖，通过计时电流法记录酶对果糖变化的实时动态响应。应用本发明的微电极生物传感器可实现原位实时监测植物中的果糖含量，对被测样本不造成本质伤害；得到的数据结果可实时动态的反映植物体内果糖的含量变化，实际应用操作简便，易于掌握。 | ||
| 搜索关键词： | 果糖 微电极 果糖脱氢酶 生物传感器 实时监测 工作电极 离子液体 实时动态 修饰 生物传感技术 计时电流法 含量变化 数据结果 铁氰化钾 应用操作 巯基乙酸 混合物 媒介体 小分子 滴涂 多层 吸附 催化 样本 应用 组装 体内 响应 记录 伤害 重复 | ||
【主权项】：
1.一种原位实时监测植物中果糖含量的微电极生物传感器，具有三电极体系，包括Ag/AgCl的参比电极，铂对电极，金工作电极，其特征在于，所述金工作电极上吸附有果糖脱氢酶；所述金工作电极上依次吸附有巯基乙酸，离子液体[Bmim]PF6，果糖脱氢酶与铁氰化钾媒介体小分子的混合物，离子液体[Bmim]PF6，果糖脱氢酶与铁氰化钾的混合物；所述金工作电极通过以下方法制备得到：(1)在金工作电极上滴涂巯基乙酸TGA，得到TGA/Au电极；(2)将离子液体[Bmim]PF6滴涂到TGA/Au电极上,(3)逐步滴涂果糖脱氢酶FDH和铁氰化钾的混合PBS溶液，室温放置，固定果糖脱氢酶，制得单层酶电极FDH/[Bmim]PF6/TGA/Au；(4)再在FDH/[Bmim]PF6/TGA/Au电极上滴涂[Bmim]PF6，再逐步滴涂FDH和铁氰化钾的混合PBS溶液，制得双层酶电极(FDH/[Bmim]PF6)2/TGA/Au。
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