[发明专利]鉴定黑色羊肚菌类群中四个种的交配型方法和引物对

摘要

本发明涉及鉴定黑色羊肚菌类群中四个种的交配型方法和引物对，属于生物技术领域，该方法为提取待测菌株DNA作为模板，以引物对P7‑2F/P7‑2R或P8‑5F/P8‑5R进行PCR扩增能获得预期条带的菌株为MAT1‑1交配型，以引物对P10‑1F/P10‑2R或P10‑2F/P10‑3R进行PCR扩增能获得预期条带的菌株为MAT1‑2交配型，2条预期的扩增条带都能检测到的菌株则具有两种交配型。这四个引物对可以通用于上述四种羊肚菌的交配型检测。本发明的检测结果特异性强，稳定可靠快速，适用于羊肚菌菌种选育、栽培、交配型基因和系统发育方面的研究。

主权项

1.鉴定黑色羊肚菌类群中四个种的交配型方法，其特征在于，包括用于检测交配型MAT1‑1的特异引物对P7‑2F/P7‑2R或P8‑5F/P8‑5R，用于检测交配型MAT1‑2的特异引物对P10‑1F/P10‑2R或P10‑2F/P10‑3R，相应的PCR扩增体系和扩增程序；所述的P7‑2F/P7‑2R特异引物对中，P7‑2F的核苷酸序列为5’‑CCGGTTTATCTTACTGGACTGGTTC‑3’，P7‑2R 的核苷酸序列为5’‑GCTTTCCTCTTCTCTCGTTGCCATA ‑3’ ；所述的P8‑5F/P8‑5R特异引物对中，P8‑5F的核苷酸序列为5’‑ATGTCACTCCGTCCGGTTTACCTTA ‑3’，P8‑5R 的核苷酸序列为5’‑TGGAATGTCTGTGATTGAGGCTGTG ‑3’ ；所述的P10‑1F/P10‑2R特异引物对中，P10‑1F的核苷酸序列为5’‑GGCCAGAACAGATGCTCGAAGAAGC ‑3’，P10‑2R 的核苷酸序列为5’‑CTCCCAAAGCATGATCAAATCCCTC ‑3’ ；所述的P10‑2F/P10‑3R特异引物对中，P10‑2F的核苷酸序列为5’‑AGACCGCTTTAGATAGATTGGCAGG ‑3’，P10‑3R 的核苷酸序列为5’‑GATCAAATCCCTCCATTAAGGCATC ‑3’；所述的黑色羊肚菌类群中四个种为梯棱羊肚菌、六妹羊肚菌、七妹羊肚菌、高羊肚菌。