[发明专利]一种低分子肝素分子量及分子量分布检测方法有效
申请号: | 201610979330.9 | 申请日: | 2016-11-04 |
公开(公告)号: | CN106442799B | 公开(公告)日: | 2019-03-05 |
发明(设计)人: | 李建科;周洋;石瑛;王景文;胡默青 | 申请(专利权)人: | 深圳市天道医药有限公司 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02 |
代理公司: | 北京华科联合专利事务所(普通合伙) 11130 | 代理人: | 王为;孟旭 |
地址: | 518052 *** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明涉及一种低分子肝素分子量及分子量分布检测方法,采用高效液相色谱法,所述方法步骤如下:步骤1,低分子肝素钠标准品溶液的配制:步骤2,低分子肝素钠分子量校准标准溶液的配制:步骤3,供试品溶液的配制:步骤4,0.01%叠氮钠溶液配制:步骤5,将上述0.01%叠氮钠溶液,低分子肝素钠标准品溶液,低分子肝素钠分子量校准标准溶液以及供试品溶液分别注入高效液相色谱仪,得到色谱图,根据色谱图计算供试品的分子量和得出分子量分布结果。 | ||
搜索关键词: | 一种 分子 肝素 分子量 分布 检测 方法 | ||
【主权项】:
1.一种低分子肝素分子量及分子量分布检测方法,采用高效液相色谱法,所述方法步骤如下:步骤1,低分子肝素钠标准品溶液的配制:称取低分子肝素钠标准品18‑22mg,加入流动相溶解成8‑12mg/ml的标准溶液,一次性0.2‑0.24μm过滤膜过滤到样品瓶中,贴好标识,将标准溶液用封口膜封口,冷冻保存,使用前取出平衡至室温并混匀再使用,步骤2,低分子肝素钠分子量校准标准溶液的配制:称取低分子肝素钠分子量校准标准品8‑12mg,加入已过滤的流动相溶解成8‑12mg/ml的校准溶液,将校准溶液分装到若干个内插管中,每支装入145‑155μl,将分装好的溶液用封口膜封口,冷冻保存,使用前取出平衡至室温并混匀再使用,步骤3,供试品溶液的配制:称取样品18‑22mg,加入流动相溶解成8‑12mg/ml的样品溶液,一次性0.2‑0.24μm过滤膜过滤到样品瓶中,贴好标识,步骤4,0.008‑0.012%叠氮钠溶液配制:称取叠氮钠48‑52mg于480‑520mL容量瓶中,加流动相溶解定容,摇匀即得,步骤5,将上述0.008‑0.012%叠氮钠溶液,低分子肝素钠标准品溶液,低分子肝素钠分子量校准标准溶液以及供试品溶液分别注入高效液相色谱仪,得到色谱图,根据色谱图计算供试品的分子量和得出分子量分布结果,其中所述高效液相色谱的色谱条件如下:流动相:25~75mM醋酸铵溶液洗脱方式:等度洗脱。
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