[发明专利]一种肠膜明串珠菌肠膜亚种不同菌株的甄别方法有效
| 申请号： | 201610980771.0 | 申请日： | 2016-11-08 |
| 公开（公告）号： | CN106498065B | 公开（公告）日： | 2019-06-21 |
| 发明（设计）人： | 鄢明辉;刘振民;吴正钧;游春苹;徐晓芬;冯华峰 | 申请（专利权）人： | 光明乳业股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/686 | 分类号： | C12Q1/686;C12Q1/689;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/01 |
| 代理公司： | 北京东正专利代理事务所(普通合伙) 11312 | 代理人： | 张伟朴 |
| 地址： | 201103 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种肠膜明串珠菌肠膜亚种不同菌株的甄别方法，该方法包括以下步骤：(1)提取待测的肠膜明串珠菌肠膜亚种不同菌株的基因组DNA；(2)以菌株样品的基因组DNA为模板，使用SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2所示的引物，进行PCR扩增，得到PCR扩增产物；(3)将PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳，根据电泳结果，将待测的肠膜明串珠菌肠膜亚种不同菌株甄别出来。本发明的方法能通过对单个基因片段的扩增及测序来实现这些高度相似的菌株之间的甄别；可用于对食品及益生菌制剂中的肠膜明串珠菌菌株的快速、简便的鉴定及甄别，从而防止一些具有优良特性的专利菌株被盗用，保障新的菌种资源在食品及益生菌制剂领域的应用。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 肠膜明 串珠 菌肠膜亚种 不同 菌株 甄别 方法 | ||
【主权项】：
1.一种肠膜明串珠菌肠膜亚种不同菌株的甄别方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：（1）提取待测的肠膜明串珠菌肠膜亚种不同菌株的基因组DNA；（2）以菌株样品的基因组DNA为模板，使用SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2所示的引物进行PCR扩增，得到PCR扩增产物；（3）将PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳，如果扩增出的片段大小有明显差异，将肠膜明串珠菌肠膜亚种不同菌株甄别出来；当其扩增产物长度相似或者在长度上的差别不足以提供准确的鉴定时，使用如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2所示的引物序列对PCR扩增产物进行双向测序，将两条引物测序结果进行拼接后，获得整个扩增片段的序列；对扩增片段的序列进行BLAST分析，将待测的肠膜明串珠菌肠膜亚种不同菌株甄别出来。
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