[发明专利]一种链霉素检测方法

摘要

本发明公开了一种链霉素检测方法，将待测样品进行酸化至pH1.5‑4.5，加入絮凝剂进行搅拌，然后进行陶瓷膜过滤；将得到的滤液用氢氧化钠将pH调节到6.0‑8.0，用大孔吸附树脂进行动态吸附，即得饱和树脂；用3‑15%的硫酸水溶液对饱和树脂进行解吸；得到的解吸液用离子交换树脂组成的混合床脱盐中和得到精制液；用200‑500Da的纳滤膜对精制液进行过滤，氮气吹干，用0.5ml按体积比计含0.2%甲酸的乙腈和水的溶液溶解残渣，其中，按体积比计，乙腈：水=70:30，供LC‑MS/MS测定。本发明对待测样品进行处理净化后，去除了众多干扰杂质，试剂用量少，无需使用离子对试剂，检测快速，灵敏度高、准确、经济。

主权项

1.一种链霉素检测方法，其特征在于，包括以下步骤：1）将待测样品进行酸化至pH1.5‑4.5，加入絮凝剂进行搅拌，然后进行陶瓷膜过滤；2）将步骤1）得到的滤液用氢氧化钠将pH调节到6.0‑8.0，用大孔吸附树脂进行动态吸附，即得饱和树脂；3）用3‑15%的硫酸水溶液对步骤2）中的饱和树脂进行解吸；得到的解吸液用离子交换树脂组成的混合床脱盐中和得到精制液；4）用200‑500Da的纳滤膜对精制液进行过滤，氮气吹干，用0.5ml按体积比计含0.2%甲酸的乙腈和水的溶液溶解残渣，其中，按体积比计，乙腈：水=70:30，供LC‑MS/MS测定；步骤1）中，絮凝剂为聚铝和聚丙烯酰胺，其组成比例为1:0.5‑5，添加量为待测样品质量的0.05‑1％；步骤2）中，动态吸附的流速为0.3‑3BV/h，大孔吸附树脂的吸附量为150‑350g/L；步骤2）中，大孔吸附树脂为D303，D308，D310中的任意一种；步骤3）中，解吸流速为0.05‑3BV/h；步骤4）中，LC‑MS/MS中，色谱柱:ACQUITYUPLCBEHHILIC柱为100mm×2.1mm，1.7μm；柱温:40℃；进样体积:10uL；流动相:A是5mM甲酸铵水溶液，甲酸铵水溶液含0.2％的甲酸，B是乙腈溶液含0.2%的甲酸；梯度洗脱：0min，A为25%；0‑0.5min，A为25%‑60%；0.5‑5.5min，A为60%；5.5‑6min，A为60%‑25%；6‑9min，A为25%；流速：0.32mL/min；离子源:电喷雾离子源；扫描方式：正离子扫描；检测方式：多反应监测；电喷雾电压：5000V；离子源温度：550℃；聚焦电压：150V；去簇电压：80V；进口电压：7V。