[发明专利]美洲黑杨69与欧美杨72杂种F1代优良单株叶片再生植株的生产方法

摘要

本发明涉及植物组织培养技术领域，具体涉及美洲黑杨69与欧美杨72杂种F1代优良单株叶片再生植株的生产方法；它的步骤具体为：1、外植体的选择与消毒；2、愈伤组织的诱导；3、不定芽的诱导；4、根的诱导；本发明美洲黑杨69与欧美杨72杂种F1代优良单株叶片再生植株的生产方法，它使用美洲黑杨69与欧美杨72杂种F1代优良单株叶片作为材料，取材方便，接种后在较短时间内形成愈伤组织直至生根形成幼苗植株，所得植株生长健壮，平均根长均明显增大。繁殖系数约为8.2，培养条件可人为控制。利用本方法，可以提高美洲黑69与欧美杨72杂种F1代优良单株的幼苗繁殖系数和成活率，培养周期短，变异少，操作方法简单，从而为杨树人工林大面积生产提供耐盐碱地的优良品种。

主权项

美洲黑杨69与欧美杨72杂种F1代优良单株叶片再生植株的生产方法，其特征在于它的步骤具体为：（1）外植体的选择与消毒：选择生长健壮无病害的美洲黑杨69与欧美杨72杂种F1代优良单株的幼嫩叶片作为外植体，将材料经流水冲洗1h，去除表面杂物，在无菌操作工作台上，先用灭菌的无菌水冲洗3遍，再用75%无水乙醇消毒30s，接着用无菌水冲洗3遍，然后用0.1% 氯化汞消毒处理5‑7 min，最后用灭菌的无菌水冲洗4遍；（2）愈伤组织的诱导：在超净工作台上，将消毒好的叶片切成5mm大小的方块，接种于诱导愈伤组织培养基上，叶的背面紧贴培养基，每瓶接种3‑4块，诱导光照条件14h/d，光照强度2000lux，温度 23‑28 ℃，湿度60%；（3）不定芽的诱导：将经过继代培养1次后的黄绿色愈伤组织转接到诱导不定芽分化培养基上，诱导光照条件14h/d，光照强度约2000lux，温度 23‑28 ℃，湿度60%；（4）根的诱导：经过不定芽诱导得到再生芽，待再生芽长到3‑5片叶子，长度0.8‑1.2cm转入诱导生根培养基诱导生根，诱导光照条件14h/d，光照强度2000lux，温度 23‑28 ℃，湿度60%。