[发明专利]一种快速检测白酒中丙氨酰-酪氨酸的方法

摘要

本发明公开了一种快速检测白酒中丙氨酰‑酪氨酸的方法，其特征在于：利用超高效液相色谱串接三重四级杆质谱仪对白酒中的丙氨酰‑酪氨酸进行检测，待测白酒酒样经旋蒸去醇后，采用ACQUITY UPLC BEH C18 1.7μm 2.1×50mm Column液相色谱柱，以流动相A(乙腈：水：三氟乙酸的体积比为80：20：0.1)+流动相B(0.01％～0.1％的三氟乙酸水溶液)进行梯度洗脱，样品经超高效液相色谱分离后，再通过三重四级杆质谱仪进行检测。本发明的方法简单，能够准确地对白酒中的丙氨酰‑酪氨酸进行定性、定量，为白酒中丙氨酰‑酪氨酸的准确判定、快速检测提供科学依据。

主权项

1.一种快速检测白酒中丙氨酰‑酪氨酸的方法,其特征在于：利用超高效液相色谱串接三重四级杆质谱仪对白酒中的丙氨酰‑酪氨酸进行检测；所用仪器为配有三重四级杆质谱仪的超高效液相色谱仪；所述方法包括如下步骤：(1)对待测白酒酒样进行前处理：准确量取50mL待测白酒酒样于100mL旋转蒸发瓶中，旋转蒸发至3‑5mL，去除待测白酒酒样中的醇类物质，然后用超纯水定容至10mL，最后经0.22μm滤膜针头过滤器过滤，获得待测样品；(2)设定超高效液相色谱仪的条件为：色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C18 1.7μm 2.1×50mm Column液相色谱柱；柱温为30～45℃；样品室温度为10～25℃；流动相：A相由乙腈、水和三氟乙酸按体积比80：20：0.1构成；B相为体积浓度0.01％～0.1％的三氟乙酸水溶液；流速为0.2～0.5mL/min；洗脱方式为梯度洗脱；进样量为1‑5μL；检测所用时间为4min；其中，所述梯度洗脱的方法为：梯度洗脱初始时，流动相A和流动相B的体积比为(90～85):(10～15)，保持0.5min；从0.5min到3.0min，流动相A和流动相B的体积比按照梯度曲线6由初始比例降至为(40～50):(60～50)；3.0min到4.0min，流动相A和流动相B的体积比按照梯度曲线6由3.0min时的比例升至为(90～85):(10～15)，维持1min，即完成整个梯度洗脱；三重四级杆质谱仪的条件设定为：离子化方式：ESI‑；监测方式：SIR；锥孔电压：25‑40V；毛细管电压：3.00‑5.00kV；脱溶剂气温度：400‑600℃；脱溶剂气流量：500‑1000L/h；锥孔气流量：50‑100L/h；离子源温度：100‑400℃；质谱方法参数表如表1：表1：质谱方法参数表(3)丙氨酰‑酪氨酸的标准曲线的绘制取丙氨酰‑酪氨酸配制质量浓度范围在50～500ng/mL的一系列标准工作溶液，然后按照步骤(2)所设定的条件取1.5mL各标准工作溶液进样、用超高效液相色谱分离、质谱检测，以待测物在质谱中的响应值对其所相应的质量浓度进行线性回归，获得丙氨酰‑酪氨酸的线性回归方程，所述线性回归方程所对应的曲线即为相应的丙氨酰‑酪氨酸的标准曲线；(4)待测白酒酒样的检测将待测白酒酒样按步骤(1)的方式进行前处理后，取1.5mL按步骤(2)的条件进行检测，通过使用质谱仪检测，获得待测样品的色谱图，对待测样品根据母离子进行定性分析，然后根据丙氨酰‑酪氨酸的标准曲线对待测白酒进行定量分析。