[发明专利]一种基于玻璃毛细管的牛血清白蛋白检测探针及其制备方法和应用

摘要

本发明提供了一种基于玻璃毛细管的牛血清白蛋白检测探针及其制备方法和应用，在该牛血清白蛋白检测探针的制备方法中，先采用廉价的氨水溶液和过氧化氢溶液使玻璃毛细管(GC)表面的羟基处于活化状态，随后利用3‑氨基丙基三乙氧基硅烷在活化后的GC表面修饰上氨基，得到NH₂‑GC；再然后将BSA键合到NH₂‑GC上，得到BSA‑GC。这种牛血清白蛋白检测探针的制备方法简单、反应条件温和、容易实现，适合工业大生产。这种牛血清白蛋白检测探针在检测BSA时，利用了抗原与抗体的特异性结合反应，同时使用HRP来标记抗体，实现特异性的可视化检测，灵敏度高。

主权项

1.一种基于玻璃毛细管的牛血清白蛋白检测探针的应用，其特征在于，其包括：步骤a：用辣根过氧化物酶标记羊抗牛血清白蛋白，得到辣根过氧化物酶标记的抗体；步骤b：将待测样品与所述辣根过氧化物酶标记的抗体混合，震荡反应4‑8min；随后，再与牛血清白蛋白检测探针混合，震荡反应4‑8min，洗涤，得到结合辣根过氧化物酶的牛血清白蛋白检测探针；步骤c：在所述结合辣根过氧化物酶的牛血清白蛋白检测探针中加入四甲基联苯胺溶液，静置12‑18min进行显色，随后加入H₂SO₄终止显色，于445‑455nm处检测吸光度，采用标准曲线法得出所述待测样品中牛血清白蛋白的含量；其中，所述牛血清白蛋白检测探针的制备方法包括：活化步骤：将玻璃毛细管与氨水溶液混合，并于65‑90℃下浸泡7‑15min,随后将所述玻璃毛细管取出后再与过氧化氢溶液混合，并于65‑90℃下浸泡7‑15min，然后再用有机溶剂洗涤所述玻璃毛细管，得到活化后的玻璃毛细管；修饰步骤：以甲苯为溶剂配制3‑氨基丙基三乙氧基硅烷溶液，所述3‑氨基丙基三乙氧基硅烷的质量分数为3‑5％，随后将所述3‑氨基丙基三乙氧基硅烷溶液与所述活化后的玻璃毛细管混合，并于20‑30℃下搅拌18‑24h，然后再用所述有机溶剂洗涤所述玻璃毛细管，得到氨基修饰的玻璃毛细管；键合步骤：将牛血清白蛋白与1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺和N‑羟基琥珀酰亚胺混合，于20‑30℃下搅拌1‑3h；随后与所述氨基修饰的玻璃毛细管混合，于20‑30℃下搅拌4‑6h，洗涤，得到所述牛血清白蛋白检测探针。