[发明专利]生产5‑氨基乙酰丙酸的谷氨酸棒杆菌工程菌株在审
| 申请号： | 201610988299.5 | 申请日： | 2016-11-09 |
| 公开（公告）号： | CN106434514A | 公开（公告）日： | 2017-02-22 |
| 发明（设计）人： | 王智文;邹亚兰;陈涛;赵学明 | 申请（专利权）人： | 天津大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12P13/00;C12R1/15 |
| 代理公司： | 天津市北洋有限责任专利代理事务所12201 | 代理人： | 陆艺 |
| 地址： | 300072*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明公开了生产5‑氨基乙酰丙酸的谷氨酸棒杆菌工程菌株，构建：(1)在谷氨酸棒杆菌ATCC 13032中敲除乳酸脱氢酶编码基因ldhA和乙酸生成基因pta‑ackA、pqo和cat，得菌株CG4；在CG4菌株中的磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶编码基因ppc前面插入sod启动子，得菌株CG5；在CG5菌株中敲除磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶编码基因pck，得菌株CG6；(2)在CG6中转入过表达5‑氨基乙酰丙酸合酶基因的质粒，得工程菌株L；(3)在L中转入过表达5‑氨基乙酰丙酸运输蛋白质粒，本发明的工程菌株能促进5‑氨基乙酰丙酸向谷氨酸棒杆菌胞外的运输，与对照菌株比较，5‑氨基乙酰丙酸的产量提高了100.4％。 | ||
| 搜索关键词： | 生产 氨基 乙酰 丙酸 谷氨酸 杆菌 工程 菌株 | ||
【主权项】：
生产5‑氨基乙酰丙酸的谷氨酸棒杆菌工程菌株构建方法，其特征是包括如下步骤：(1)在谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)ATCC 13032中敲除乳酸脱氢酶编码基因ldhA和乙酸生成基因pta‑ackA、pqo和cat，得到的菌株命名为CG4；在CG4菌株中的磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶编码基因ppc前面插入sod启动子，得到菌株CG5；在CG5菌株中敲除磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶编码基因pck，得到菌株CG6；(2)在菌株CG6中转入构建好的过表达5‑氨基乙酰丙酸合酶基因的质粒pXA，得到生产5‑氨基乙酰丙酸的谷氨酸棒杆菌工程菌株L；(3)在菌株L中转入构建好的过表达5‑氨基乙酰丙酸运输蛋白质粒pEP‑Ncgl0580，得到生产5‑氨基乙酰丙酸的谷氨酸棒杆菌工程菌株L2。
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