[发明专利]稳定表达牛胰蛋白酶原的MDCK细胞系及其用途有效
| 申请号： | 201610990887.2 | 申请日： | 2016-11-10 |
| 公开（公告）号： | CN106520700B | 公开（公告）日： | 2019-12-27 |
| 发明（设计）人： | 江征;朱秀娟;李长贵 | 申请（专利权）人： | 中国食品药品检定研究院 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N15/85;C12N7/00;C12N9/76;A61K39/145;A61P31/16 |
| 代理公司： | 11535 北京知元同创知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 刘元霞;牛艳玲 |
| 地址： | 100050*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供一株稳定分泌表达牛胰蛋白酶原(S.pro‑try)的MDCK工程细胞系，及其在培养流感病毒、生产流感病毒疫苗中的应用，属于生物技术领域。本发明还提供一种构建上述细胞系的方法，通过构建分泌型、胞内型、跨膜型3种亚细胞分布的牛胰酶原和牛胰酶表达基因序列的步骤，并瞬时转染MDCK筛选提高人流感病毒滴度的最佳表达模式。本发明所提供的细胞系，一方面为将来大规模流感疫苗生产奠定细胞基础，解决疫苗产能扩大和品质提高的关键问题；另一方面也可以作为实验室有效分离培养和监测流感病毒、抗流感病毒药物的筛选、中和抗体的测定等其他方面的研究工具，具有广泛的应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 稳定 表达 胰蛋白酶 mdck 细胞系 及其 用途 | ||
【主权项】：
1.一种表达分泌型牛胰蛋白酶原的修饰的MDCK细胞系，其特征在于，所述细胞系含有整合入其细胞基因组的完整的分泌型牛胰蛋白酶原S.pro-try的编码基因，所述编码S.pro-try的基因序列前加入Kozak序列，并对核酸序列的编码区进行适用于犬类的密码子优化设计，所述编码S.pro-try的基因序列如SEQ ID No.1所示，所述细胞系为MTY6，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.12681。/n
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