[发明专利]重组基因工程菌发酵合成2,5‑呋喃二甲酸的方法在审
| 申请号： | 201610997507.8 | 申请日： | 2016-11-14 |
| 公开（公告）号： | CN106497957A | 公开（公告）日： | 2017-03-15 |
| 发明（设计）人： | 胡晓;胡曼曼;王理想;孙永先;张伟;姚唤峰;刘旭东;赵红;胡丹红;李玉平;瞿志荣;胡伟 | 申请（专利权）人： | 安徽瑞赛生化科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12P17/04 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 235158 *** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明公开了重组基因工程菌发酵合成2,5‑呋喃二甲酸的方法，是将梭菌属甘油脱水酶基因gldABC，整合进土生克雷伯杆菌基因dhaβ,形成重组DNA基因gldha；通过PCR扩增，并经修饰后插入大肠杆菌表达载体pTE28aT7，构建2,5‑呋喃二甲酸工程菌pTE28aT7‑gldha；在异丙基硫代半乳糖苷（IPTG）诱导下，在含有果糖的限制培养基中，经深度发酵合成2,5‑呋喃二甲酸；通过过滤发酵液、有机溶剂萃取结晶和组合溶剂重结晶获得产品2,5‑呋喃二甲酸。本发明的重组基因工程菌发酵合成2,5‑呋喃二甲酸的方法简明、产量高、成本低廉，在2,5‑呋喃二甲酸的微生物法制备中发挥重要的作用，应用前景广阔。 | ||
| 搜索关键词： | 重组 基因工程 发酵 合成 呋喃 甲酸 方法 | ||
【主权项】：
本发明涉及重组基因工程菌发酵合成2,5‑呋喃二甲酸的方法，包括：（1）是将梭菌属甘油脱水酶基因gldABC，整合进土生克雷伯杆菌基因dhaβ,形成重组DNA基因gldha；（2）通过PCR扩增，并经修饰后插入大肠杆菌表达载体pTE28aT7，构建2,5‑呋喃二甲酸工程菌pTE28aT7‑gldha；（3）在异丙基硫代半乳糖苷（IPTG）诱导下，采用高通量筛选法筛选高效菌株；（4）在含有果糖的限制培养基中，经深度发酵合成2,5‑呋喃二甲酸，通过过滤发酵液、有机溶剂萃取结晶和组合溶剂重结晶获得产品2,5‑呋喃二甲酸。
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