[发明专利]一种食用土当归种苗的组织培养方法

摘要

本发明公开了一种食用土当归种苗的组织培养方法，先从土当归的叶片中诱导出愈伤组织，然后使其形成不定胚，再继代增殖不定胚芽，通过循环培养分离成单个的不定胚，在固体培养基上培养成苗。本发明的优点在于：选用配方合理的培养基，培养出的组培苗生根率高，稳定性好。该方法易操作，而且不受外界条件的限制，四季皆可进行，节约育苗占地面积，降低生产成本，不污染环境，可以实现批量生产。通过本发明方法生产土当归，产量大，成本低，周期短，极具市场竞争力。本方法不仅取材方便，不会影响土当归野生种群的数量；而且操作简单、生产成本低、稳定高效，能大大缩短育苗周期，将为其保护和开发利用提供技术保障。

主权项

1.一种食用土当归种苗的组织培养方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）外植体处理：取土当归叶片为外植体，用清水洗去其表面的尘土，于70%酒精浸泡20‑30s，无菌水冲洗2~3次，再用0.1%升汞溶液浸泡消毒7~10min，再用无菌水冲洗3~5次，最后用无菌滤纸吸干外植体表面水分；（2）外植体的初代培养：将处理后的外植体用解剖刀切成1.0cm×1.0cm的小块，接种于MS+TDZ0~0.1mg/L +6‑BA0.1~0.5mg/L+NAA0.05~0.5mg/L + 蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L， pH5.8的培养基中，初代培养50天，培养温度25±2℃，光照时间12h/d，光照强度2000~3000lx；（3）继代培养：经初代培养后，叶片边缘诱导产生大量小苗，将小苗接入MS+0.1%活性炭+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L，pH5.8的培养基中培养，培养温度25±2℃，光照时间12h/d，光照强度2000~3000lx；继代3天开始有根发生，培养35~40天长成完整健壮小苗，株高2‑3cm，根的数目为8‑20根；（4）炼苗与移栽：待土当归小苗株高2~3cm时，打开培养瓶盖，在室温下炼苗7天后，将小苗移栽至珍珠岩:红辉沸石＝1:1混合的基质中。