[发明专利]一种潜血速测用毛细管阵列制备方法及应用

摘要

本发明涉及一种潜血速测用毛细管阵列制备方法及应用,借助潜血中血红蛋白催化内壁上封装基质的显色反应，以及毛细现象自动吸取样品，实现对潜血快速、灵敏、高通量的可视化检测，首先在毛细管内壁修饰有多孔水凝胶封装的过氧化物酶催化反应基质，制备可视化比色的毛细管阵列，进而通过毛细管的毛细作用自动吸入样品，并利用潜血样品中的血红蛋白催化内壁上水凝胶封装的过氧化物酶基质底物的显色反应，导致毛细管显示出不同程度的蓝色，直接、快速定量或可视化判定样品中血红蛋白含量，具有快速、灵敏、高通量、样品用量少、成本低、可视化等特点。

主权项

1.一种潜血速测用毛细管阵列制备方法，其特征在于，步骤包括：（1）采用食人鱼洗液清洗毛细管的内外管壁，再用超纯水和乙醇清洗，40℃烘干，然后用4.0‑8.0 wt% 的十六烷基三甲基硅烷的乙醇溶液浸泡6 h，取出后用无水乙醇清洗，干燥，备用；（2）将1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐和N‑羟基琥珀酰亚胺按质量比3:1混合后，再加入0.2‑1.2倍质量的对羟基苯丙酸混合均匀，然后将上述混合物加入到MES缓冲液中，浓度为6‑11mg/ mL，室温下搅拌15min，得到含有EDC‑NHS活化的HPA的混合液，然后向上述混合液中加入0.5 ‑ 6 % (w/v）的明胶，在搅拌下加热到50℃，待明胶全部溶解后，冷却到室温，并且搅拌过夜，得到Gel‑HPA水凝胶；（3）将得到的Gel‑HPA水凝胶采用透析膜在去离子水中透析6h，然后采用EDC‑NHS活化，随后加入双氧水至浓度为0.1 ‑16 mM，得到双氧水掺杂的活化Gel‑HPA水凝胶；（4）向步骤（3）制得的双氧水掺杂的活化Gel‑HPA水凝胶中按体积比1:2加入1 ‑80 mg/mL的3,3',5,5'‑四甲基联苯胺－二甲基亚砜，得到水凝胶封装过氧化物酶催化反应基质；（5）将步骤（1）处理过的毛细管浸入步骤（4）得到的水凝胶封装过氧化物酶催化反应基质中，反应24h后，取出毛细管，采用去离子水冲洗两次，干燥，制得内壁修饰了装填双氧水的Gel‑HPA‑TMB复合材料的毛细管；（6）上述毛细管处理方法应用于批量毛细管制备，得到潜血速测用毛细管阵列。