[发明专利]一种测定奥贝胆酸片溶出度的方法

摘要

本发明公开了一种测定奥贝胆酸片溶出度的方法。该检测方法包括以下步骤：步骤一，溶液制备；步骤二，提取奥贝胆酸干品；步骤三，衍生化反应；步骤四，用高效液相色谱‑荧光检测器进行检测，步骤五，计算得出待测样品中奥贝胆酸的含量。本方法合理选择高效液相色谱测定参数和测试步骤，选择荧光检测器并用外标法定量，实现了奥贝胆酸片溶出度的精密测定。该方法具有经济有效、专属性强、精密度高、抗干扰能力强和灵敏度的特点。

主权项

1.一种测定奥贝胆酸片溶出度的方法，其特征在于所述奥贝胆酸片溶出度的测定方法包括以下步骤：步骤一，溶液制备供试品溶液的制备：取奥贝胆酸片1-12个单位，采用中国药典2015年版四部中溶出度测定法第二法，以0.1mol/l盐酸、醋酸盐缓冲液、磷酸盐缓冲液或水为溶出介质，转速为每分钟50-100转，依法操作，在不同时间取样，分别取溶液3-5ml，滤过，精密量取续滤液作为供试品溶液；对照品溶液的制备：精密量取对照品适量，加对应的溶出介质制成每1ml中含奥贝胆酸0.1-30微克的溶液作为对照品溶液；步骤二，提取奥贝胆酸干品分别精密量取供试品溶液、对照品溶液1~5ml置于玻璃离心管中，加入内标物的三氯甲烷溶液1~10ml置于涡旋仪中涡旋5-10分钟后，离心分相，精密移取下层清液1~5ml挥干得试样干品；步骤三，衍生化反应向试样干品中加入0.5~5ml HEA混合衍生化试剂溶液，加盖密封后，于50℃~70℃下衍生反应1~3小时，衍生反应结束后冷却至室温；置于通风橱中，根据奥贝胆酸的含量情况加无水乙腈稀释1~10倍，经有机滤膜过滤至样品瓶中，得待测样液；所述HEA混合衍生试剂由HEA溶液、DMAP溶液、EDC溶液按2.5:1:1比例混合，临用新制，其中，HEA溶液：精密称取5mgHEA，加入10ml量瓶中，用无水乙腈溶解并稀释至刻度，0.5mg/ml；DMAP溶液：称取0.4gDMAP于10ml量瓶中用无水乙腈溶解并稀释至刻度，40mg/ml；EDC溶液：称取0.1gEDC于10ml量瓶中用无水乙腈溶解并稀释至刻度，10mg/ml；步骤四 用高效液相色谱-荧光检测器进行测定检测条件如下：a色谱柱：苯基色谱柱、C4色谱柱或C8色谱柱中的一种， b色谱柱温度：20℃~40℃，c荧光检测器：激发波长384nm~404nm，发射波长421nm~440nm，d流动相：乙腈-水=55:45 或者乙腈-甲醇-水=50:5:45，e流速：0.8~1.2ml/min，f进样量：10μl~50μl；步骤五，计算样品中奥贝胆酸的溶出度；同时按步骤一、二、三、四、五检测空白样品。