[发明专利]一种Ho3+检测试剂及其制备方法和应用

摘要

本发明提供了一种Ho³⁺的检测试剂及其合成方法和应用，所述试剂为2‑丁基‑6‑羟基‑1,3‑二氧代‑2,3‑二氢‑1H‑苯并[d]异喹啉‑5‑甲醛。试剂合成：以4‑溴‑1，8‑萘二甲酸酐和正丁胺为原料制得N‑正丁基‑4‑溴‑1，8‑萘二甲酸酐；加入甲醇钠并以五水硫酸铜作催化剂制得N‑正丁基‑4‑甲氧基‑1，8‑萘二甲酸酐；和氢碘酸反应制得N‑正丁基‑4‑羟基‑1，8‑萘二甲酸酐；最后加入环六亚甲基四胺在三氟乙酸中回流制得2‑丁基‑6‑羟基‑1,3‑二氧代‑2,3‑二氢‑1H‑苯并[d]异喹啉‑5‑甲醛。检测Ho³⁺的方法：在含有2‑丁基‑6‑羟基‑1,3‑二氧代‑2,3‑二氢‑1H‑苯并[d]异喹啉‑5‑甲醛的pH为7.4的HEPES溶液中，通过荧光分光光度计定量测定Ho³⁺的含量。该检测方法由于是比率型荧光探针，灵敏度高，抗干扰，检测过程简单、快速，检测结果准确。

主权项

1.一种检测Ho³⁺的方法，其特征在于，步骤为：(1)、配制pH＝7.4,浓度为10mM的HEPES缓冲溶液，配制10mM的2‑丁基‑6‑羟基‑1,3‑二氧代‑2,3‑二氢‑1H‑苯并[d]异喹啉‑5‑甲醛的DMSO溶液，用蒸馏水配制10mM的钬离子溶液；(2)、将1000μL pH 7.4的HEPES缓冲溶液、1000μL DMSO溶液和2.5μL 2‑丁基‑6‑羟基‑1,3‑二氧代‑2,3‑二氢‑1H‑苯并[d]异喹啉‑5‑甲醛的DMSO溶液加入到干净的荧光比色皿中，在荧光分光光度仪上检测，随着待测样品的加入，512nm的荧光强度逐渐减弱，480nm的荧光强度逐渐增强；(3)、把1000μL pH 7.4的HEPES缓冲溶液、1000μL DMSO溶液和2.5μL 2‑丁基‑6‑羟基‑1,3‑二氧代‑2,3‑二氢‑1H‑苯并[d]异喹啉‑5‑甲醛的DMSO溶液加到另外11个荧光比色皿中，分别再加入体积为0、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50μL的钬离子溶液，在荧光分光光度仪上测定512nm和480nm对应的荧光强度，F₄₈₀为1394、1832、2182、2424、2661、3075、3404、3770、4106、4307、4449，F₅₁₂为4130、3970、3897、3812、3761、3669、3548、3533、3475、3348、3305，以钬离子浓度为横坐标，以相应的荧光强度比值I₄₈₀/I₅₁₂为纵坐标绘制图，得到钬离子浓度的工作曲线，线性回归方程为：I₄₈₀/I₅₁₂＝0.00412c+0.3375，c的单位为μM；(4)、将1000μL pH 7.4的HEPES缓冲溶液、1000μL DMSO溶液和2.5μL 2‑丁基‑6‑羟基‑1,3‑二氧代‑2,3‑二氢‑1H‑苯并[d]异喹啉‑5‑甲醛的DMSO溶液加到干净的荧光比色皿中，用微量进样器吸取Vμl待测样品溶液，加入到此干净的荧光比色皿中，在荧光分光光度仪上检测，将测得的荧光强度代入(3)的线性回归方程，得到浓度c，待测样品C_待测样＝2000μL×c×10^‑6/VμL，即可求得Ho³⁺的浓度。