[发明专利]一种海洋真菌爪曲霉溴代缩酚环酸醚类化合物及其制备方法和应用

摘要

本发明公开了一种海洋真菌爪曲霉溴代缩酚环酸醚类化合物及其制备方法和应用。所述海洋真菌爪曲霉溴代缩酚环酸醚类化合物的化学结构式如下式（）所示：该化合物是通过将爪曲霉DLEP2008001接种于真菌培养基中静置发酵，发酵液经乙酸乙酯萃取，菌丝体由有机溶剂提取，合并后粗提物用有机溶剂进行硅胶柱梯度层析，经硅胶薄层层析检测，将含有目标物质的洗脱组分继续进行硅胶柱、凝胶柱层析和正相制备液相色谱分离纯化得到的。该化合物可抑制真菌白色假丝酵母、革兰氏阴性菌铜绿假单胞菌和革兰氏阳性菌耐甲氧基青霉素金黄色葡萄球菌，并杀死卤虫幼虫，具有作为抗真菌抗生素、抗细菌抗生素或杀虫剂的潜在用途。

主权项

1.一种海洋真菌爪曲霉溴代缩酚酸环醚类化合物的制备方法，其特征在于，所述化合物的化学结构式如式(I)所示：其制备方法包括如下步骤：S1.发酵：将爪曲霉DLEP2008001接种于真菌液体培养基中静置发酵后，分别收集菌丝体和发酵液；S2.粗提：将步骤S1的发酵液经乙酸乙酯萃取后浓缩，菌丝体经有机溶剂提取后浓缩，将所得浓缩物合并后得粗提物；S3.分离纯化：将步骤S2的粗提物进行硅胶柱梯度层析，经硅胶薄层层析检测，将含有目标物质的洗脱组分继续进行硅胶柱、凝胶柱层析和正相制备液相色谱分离纯化，得到目标化合物；其中，步骤S1所述真菌液体培养基的配方为：每升中含有如下组分：土豆汁400～600mL，NaBr 15～25g，蔗糖15～25g，纯水或自来水400～600mL；步骤S1所述发酵是静置发酵2～4天后，加入终浓度为0.5～2mM的普鲁卡因溶液，继续发酵18～22天；步骤S2所述乙酸乙酯萃取次数为2～4次，所述有机溶剂萃取次数为2～4次；所述有机溶剂为氯仿、丙酮、乙酸乙酯、乙醇、甲醇中一种或几种；步骤S3所述分离纯化的具体方法如下：a.将步骤S2获得的粗提物经硅胶柱层析，用石油醚‑二氯甲烷或石油醚‑氯仿进行预洗脱，继而用氯仿‑甲醇或二氯甲烷‑甲醇进行梯度洗脱，收集以洗脱液体积比100：0～100：1梯度的洗脱的组分；组分特征为硅胶薄层层析板上展开剂为体积比15：1的氯仿‑甲醇溶液展开下，比移值为0.29～0.74的混合物组分；b.将步骤a收集的洗脱组分再进行硅胶柱层析，洗脱液为体积比5：1的石油醚‑丙酮；c.将步骤b收集的洗脱组分进行葡聚糖凝胶柱层析，洗脱液为甲醇，流速0.5～0.7mL/min；d.将步骤c收集的洗脱组分进行正向制备液相色谱纯化，洗脱液为体积比3～5：1的氯仿‑石油醚，在硅胶柱填充20～30g硅胶、流速2～4mL/min情况下，收集保留时间为14～28min的组分；e.将步骤d收集的洗脱组分继续进行正向制备液相色谱纯化，洗脱液为纯氯仿，在硅胶柱填充10～15g硅胶、流速1～3mL/min情况下，收集保留时间为14～35min的主峰，得到收集物。