[发明专利]一种快速检测恰特草主要成分的方法

摘要

本发明提供了一种快速检测恰特草主要成分的方法，还涉及一种检测可疑物中是否存在恰特草的方法。所述快速检测恰特草主要成分的方法，主要包括以下步骤：冷冻研磨待检恰特草样品，制得恰特草粉末；配制待进样溶液；LC‑MS/MS分析。采用本发明所提供的快速检测恰特草主要成分的方法，前处理过程稳定，无任何特殊要求；本发明所采用的冷冻研磨技术，提取耗时短，提取回收率高，将待检测恰特草样品在液氮中迅速冷冻，然后将其磨成粉末，有利于样品中的主要成分充分释放，从而在保持生物活性的同时实现了快速研磨粉碎，有利于接着进行的液质联用分析；LC‑MS/MS分析的最低检出限极低，从而提升了检测灵敏度，有利于对疑似恰特草的可疑物实施快速鉴定。

主权项

1.一种快速检测恰特草主要成分的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)冷冻研磨待检恰特草样品，制得恰特草粉末；(2)配制待进样溶液，包括：将所述恰特草粉末置于容器中，并加入盐酸，超声震荡，接着，用NaOH溶液调节pH至12；然后加入乙酸乙酯萃取，涡旋混匀，离心后取上清液，60℃水浴中吹干，最后加入乙腈复溶，制得所述待进样溶液；(3)LC‑MS/MS分析；其中，步骤(1)所述的冷冻研磨包括：将待检恰特草剪碎，得待检恰特草样品；取待检恰特草样品，置于冷冻研磨管中，并向所述冷冻研磨管中加入一个磁撞子，随后将所述冷冻研磨管浸入液氮中，在‑196℃下电磁驱动磁撞子振荡，以来回撞击所述待检恰特草样品，制得恰特草粉末；步骤(3)所述的LC‑MS/MS分析中，液相色谱条件如下：RESTEK PFPP柱，5μm，100mm×2.1mm；前接Phenomenex保护柱，4mm×2mm；流动相由A和B组成，其中，流动相A为含20mmol/L的乙酸铵和0.1％v/v甲酸的缓冲溶液，流动相B为乙腈；进样量为5μL，采用梯度洗脱；质谱条件如下：电喷雾离子源，正离子扫描模式/ESI+，采用多反应监测模式检测；离子喷雾电压：5.5kV；碰撞气为氮气：10psi；气帘气：10psi；雾化气：20psi；辅助气：40psi；离子源温度：500℃；测得卡西酮的特征碎片离子m/z为150.1/117.2、150.1/132.1，保留时间为2.81min；去甲麻黄碱的特征碎片离子m/z为152.1/134.2、152.1/117.2，保留时间为2.74min。