[发明专利]I型鸭肝炎病毒和鸭瘟病毒一步法PCR检测方法有效
| 申请号： | 201611029922.0 | 申请日： | 2016-11-15 |
| 公开（公告）号： | CN106399591B | 公开（公告）日： | 2019-11-26 |
| 发明（设计）人： | 赵丽丽;陈洪岩;韩凌霞;张圆圆;陆涛峰 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/686 |
| 代理公司： | 11419 北京爱普纳杰专利代理事务所(特殊普通合伙) | 代理人： | 王玉松<国际申请>=<国际公布>=<进入 |
| 地址： | 150069 黑龙*** | 国省代码： | 黑龙;23 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种鸭肝炎病毒和鸭瘟病毒一步法PCR检测方法，首先分别选取鸭肝炎病毒和鸭瘟病毒中高度保守的基因为目标片段I和目标片段Ⅱ，设计并合成相应的特异性引物I和特异性引物Ⅱ；然后分别对鸭肝炎病毒和鸭瘟病毒的基因组RNA和DNA进行提取，将其混合作为模板，进行二重PCR扩增；最后用琼脂糖凝胶电泳对得到的二重PCR产物进行分析。本发明提供的鸭肝炎病毒和鸭瘟病毒一步法PCR检测方法操作简单、省时省力，可以在同一个反应体系中进行PCR和RT‑PCR，同时对DNA病毒(鸭瘟病毒)和RNA病毒(鸭肝炎病毒)进行扩增和检测，大大减少分别检测所花费的时间和人力成本；本方法具有良好的特异性，能够扩增出高度特异的片段，并且产物杂质极少，适合推广使用。 | ||
| 搜索关键词： | 肝炎 病毒 瘟病 一步法 pcr 检测 方法 | ||
【主权项】：
1.一种I型鸭肝炎病毒和鸭瘟病毒一步法PCR检测试剂盒，其特征在于，包括用于对I型鸭肝炎病毒基因组RNA中高度保守的目的片段I进行RT-PCR扩增的的特异性引物对I、以及用于对鸭瘟病毒基因组DNA中高度保守的目的片段Ⅱ进行PCR扩增的特异性引物对Ⅱ，所述特异性引物对I的序列如下：/n上游引物P1：5'AGCTTAAGGCCCGGTGCCCCGTTCT 3'；/n下游引物P2：5'GGTAGGGTAGGGAATAGTAAAGTAA 3'；/n所述特异性引物Ⅱ的序列如下：/n上游引物P3：5'TGGGAAGGCTTTCGGTCGC 3'；/n下游引物P4：5'CATTCGCGCCTTTGCTAAATTCTCT 3'。/n
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